1、本課題以新發(fā)現的分別與腦紅蛋白、胞紅蛋白的相互作用蛋白為切入點，深入探討新發(fā)現攜氧珠蛋白的缺氧保護功能機制。課題分兩部分進行： 第一部分中集中于酵母雙雜交篩選到的與腦紅蛋白相互作用蛋白—谷氨酰脯氨酰tRNA合成酶(EPRS)開展相關研究，首先采用一系列生物化學技術證明NGB與EPRS之間存在相互作用，并基于EPRS的結構和功能，篩選并驗證缺氧敏感性的氨基酰tRNA合成酶成員(ARSs)，發(fā)現組氨酰tRNA合成酶、異亮氨酰tRNA

2、合成酶、谷氨酰胺tRNA合成酶以及輔酶因子P43均對COCl<,2>模擬的缺氧刺激表現出一定的敏感性，為理解ARS在神經系統(tǒng)缺氧損傷中的作用奠定基礎以及為明晰NGB抗缺氧的分子機制提供了一定線索。 第二部分中基于實驗室前期采用酵母雙雜交篩選到的與CGB相互作用的金屬硫蛋白Ⅱ(MT2)開展相關研究。繼前期酵母回轉實驗、細胞熒光共定位實驗之后，首先采用免疫共沉淀技術驗證CGB與MT2在生理水平存在相互作用，然后基于MT2清除重金屬毒