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![280nm LED-紫外線對HL-60細(xì)胞增殖的影響及機(jī)制研究.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/19/12/e22eb780-69b6-4c42-b9e8-47c9e60d86dd/e22eb780-69b6-4c42-b9e8-47c9e60d86dd1.gif)
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文檔簡介
1、目的:
觀察280nm LED-紫外線(Light Emitting Diode-Ultraviolet,LED-UV)對HL-60細(xì)胞增殖的影響并研究其發(fā)生機(jī)制。
方法:
取對數(shù)生長期的急性早幼粒白血病細(xì)胞標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞株(HL-60)作為研究對象,280nmLED-UV作為光源,實(shí)驗(yàn)分為A-E五組(對照組A及實(shí)驗(yàn)組B-E),分別以0J/m2、8J/m2、15J/m2、30J/m2、60J/m2的劑量照射細(xì)胞,
2、隨后將各組細(xì)胞置于含10%胎牛血清的IMDM培養(yǎng)液、37℃、5%CO2、飽和濕度的條件下培養(yǎng)2小時(shí)。倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況及形態(tài)變化,CCK-8檢測細(xì)胞增殖抑制率,熒光定量PCR檢測Bcl-2基因的表達(dá)量,AnnexinⅤ-FITC/PI雙染流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡,PI染色流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞周期分布。
結(jié)果:
1.HL-60細(xì)胞生長及形態(tài)變化:對照組細(xì)胞形態(tài)完整、圓形透亮、排列整齊、密度較大。實(shí)驗(yàn)組隨著LED-
3、UV劑量的增大,細(xì)胞皺縮、透亮度降低、排列紊亂、密度減少。E組可見大量崩解破碎的細(xì)胞。
2.HL-60細(xì)胞增殖抑制率:實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞增殖抑制率的比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=1297.68,P<0.01),且隨著LED-UV劑量的增大,細(xì)胞增殖抑制率逐漸升高,各組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值均<0.01)。
3.HL-60細(xì)胞Bcl-2基因的表達(dá)量:實(shí)驗(yàn)組Bcl-2基因表達(dá)量的比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=54.34,P<0.0
4、1)。B-D組隨著LED-UV劑量的增大,Bcl-2基因的表達(dá)量逐漸降低,各組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值均<0.01);而E組Bcl-2基因的表達(dá)量明顯高于D組(P<0.01)。
4.HL-60細(xì)胞凋亡率:各組細(xì)胞凋亡率的比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=293.50,P<0.01)。 A-D組隨著LED-UV劑量的增大,細(xì)胞凋亡率逐漸升高,各組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值均<0.01);而E組細(xì)胞凋亡率明顯低于D組(P<0.01)
5、。
5.HL-60細(xì)胞周期分布:各組G0/G1期細(xì)胞比例的比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=173.44,P<0.01)。A-D組隨著LED-UV劑量的增大,G0/G1期細(xì)胞比例逐漸升高,各組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值均<0.05);而E組G0/G1期細(xì)胞比例明顯低于D組(P<0.01)。
結(jié)論:
1.280nm LED-UV能抑制HL-60細(xì)胞Bcl-2基因的表達(dá),在8-30J/m2劑量范圍內(nèi)呈劑量依賴性,劑量
6、為30J/m2時(shí)抑制作用最強(qiáng),60J/m2時(shí)抑制作用明顯降低。
2.280nm LED-UV能誘導(dǎo)HL-60細(xì)胞凋亡,在0-30J/m2劑量范圍內(nèi)呈劑量依賴性,劑量為30J/m2時(shí)凋亡率最高,60J/m2時(shí)凋亡率明顯降低。
3.280nm LED-UV能使HL-60細(xì)胞周期阻滯于G0/G1期,在0-30J/m2劑量范圍內(nèi)呈劑量依賴性,劑量為30J/m2時(shí)阻滯作用最強(qiáng),60J/m2時(shí)阻滯作用明顯降低。
4.2
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