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![ICC-RT—PCR半定量分析法檢測甲型肝炎病毒(HAV)減毒活疫苗感染性滴度的研究.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/19/13/5ae385bc-8730-4598-a626-53e2b79505d2/5ae385bc-8730-4598-a626-53e2b79505d21.gif)
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文檔簡介
1、 本研究對快速檢測甲肝病毒減毒活疫苗感染性滴度方法的建立進行了探索。我們采用聯(lián)合細胞培養(yǎng)和分子生物學技術建立了以細胞培養(yǎng)/逆轉錄聚合酶鏈式反應(Integratedcellculture/reversetranscriptase-polymerasechainreaction;ICC/RT-PCR)及凝膠掃描半定量分析來檢測甲肝減毒活疫苗滴度,并與LgCCID50法的結果作了比較,建立了一種快速、靈敏、特異地檢測甲肝病毒減毒活疫苗感染
2、性滴度的方法。ICC/RT-PCR法結合了細胞培養(yǎng)法與分子生物學方法的優(yōu)點,可將疫苗感染性滴度的檢測時間由LgCCID50法的一個月左右縮短到1周左右。感染性甲肝病毒滴度為7.50LgCCID50/ml的甲肝病毒疫苗參考品經(jīng)ICC/RT-PCR半定量分析法在第4天后檢測到的滴度為7.67,而經(jīng)滅活的參考品在10。稀釋度未產(chǎn)生陽性結果,表明該法有著較好的靈敏度和特異性。用該法檢測疫苗樣品,在培養(yǎng)時間為4天的結果與目前常用的細胞培養(yǎng)法(Lg
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