1、云南蘿芙木(Rauvolfiayunnanensis Tsiang)是我國(guó)的重要藥用植物,含有多種生物堿,如利血平、育亨賓、阿馬尼新等。其中的利血平主要用于治療高血壓。育亨賓具有廣泛的藥理作用,主要被用來治療男性性功能障礙,也可用于治療風(fēng)濕、動(dòng)脈硬化等。
　　 纖維素酶和果膠酶能水解植物細(xì)胞壁,促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)有效成分的溶出,通過對(duì)纖維素和果膠的分解能簡(jiǎn)化物質(zhì)分離純化的步驟。生物酶降解技術(shù)作為提取和分離天然產(chǎn)物中有效成分的一種新興技術(shù)

2、,被越來越廣泛的應(yīng)用。目前國(guó)內(nèi)暫沒有利用酶降解提取利血平和育亨賓的研究報(bào)道。
　　 本文在已有的利血平和育亨賓提取工藝的基礎(chǔ)上,進(jìn)行了纖維素酶和果膠酶降解植物細(xì)胞壁提取云南蘿芙木中利血平和育亨賓的實(shí)驗(yàn)研究。
　　 首先研究了高效液相色譜法共同測(cè)定云南蘿芙木中利血平和育亨賓的色譜條件。色譜柱為VP-ODS C18。選擇流動(dòng)相為:流動(dòng)相A,甲醇；流動(dòng)相B,0.004mol/L二乙胺；梯度洗脫程序?yàn)?0～20min,60％A-

3、40％B；20～40min,A:60％→95％,B:40％→5％；流速:1mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)278nm；柱溫:30℃。
　　 對(duì)比四種提取溶劑:甲醇、95％乙醇、50％乙醇(含0.05mol/L H2SO4)、1％乙酸溶液,比較加酶組和不加酶組利血平和育亨賓提取量。結(jié)果表明:未經(jīng)優(yōu)化條件下,加纖維素酶后利血平提取率分別提高了27.93％、25.05％、25.28％、53.01％；育亨賓分別提高了29.05％、61.19％、3

4、1.15％、81.15％。
　　 纖維素酶和果膠酶解提取利血平和育亨賓的最佳反應(yīng)條件研究:先加酶提后加入1％乙酸繼續(xù)提取,結(jié)果表明:纖維素酶作用的最佳條件為:pH4.5、溫度50℃、時(shí)間4h、酶用量1.2mg/g。在纖維素酶作用最佳條件下同時(shí)加入1mg/g果膠酶,可有效縮短提取時(shí)間,提高提取的效率。確定酶水解條件為pH值4.5、溫度50℃、時(shí)間4h、酶用量1.2mg/g,果膠酶1mg/g。與常用的溶劑甲醇、95％乙醇、50％乙醇