1、肺損傷是臨床體外循環(huán)(CPB)術(shù)后最主要的并發(fā)癥之一。幾乎所有患者均有不同程度的肺功能減退，嚴(yán)重者導(dǎo)致急性呼吸窘迫綜合癥。肺缺血再灌注損傷(Ischemia Reperfusion Injury，IRI)引起的肺功能障礙，是體外循環(huán)心臟手術(shù)后最常見的并發(fā)癥和導(dǎo)致死亡的主要原因之一。
　　 高遷移族蛋白B1(HMGB1，high mobility group B1)是一種DNA結(jié)合蛋白，參與調(diào)控DNA轉(zhuǎn)錄等過程。進(jìn)來發(fā)現(xiàn)核外HMG

2、B1具有細(xì)胞因子樣作用，在急性肺損傷的病理過程中具有重要作用.參與多器官缺血再灌注損傷，如肝臟、大腦和心臟。但對(duì)體外循環(huán)肺損傷的作用未見報(bào)道。
　　 氧控制性再灌注具有抗缺血再灌注損傷作用，而臨床上通過體外循環(huán)氧調(diào)節(jié)器極易調(diào)節(jié)氧濃度。如果通過實(shí)驗(yàn)?zāi)苓M(jìn)一步證實(shí)氧控制性再灌注對(duì)肺缺血再灌注損傷的保護(hù)作用，那么將對(duì)臨床工作產(chǎn)生深遠(yuǎn)的意義。氧控制性再灌注對(duì)體外循環(huán)肺缺血再灌注損傷的作用未見報(bào)道。
　　 本文通過犬模型模擬臨床體外

3、循環(huán)過程，證實(shí)以下設(shè)想：1.氧控制性再灌注具有抗體外循環(huán)肺缺血再灌注損傷的作用。2.HMGBI通過與晚期糖基化終產(chǎn)物受體(RAGE，receptor for advanced glycation end product)結(jié)合，激活下游核因子kappa B(NF-kB)及細(xì)胞因子介導(dǎo)體外循環(huán)肺缺血再灌注損傷。3.氧控制性再灌注通過HMGB1信號(hào)通路抑制外循環(huán)肺缺血再灌注損傷。本研究分兩部分，現(xiàn)摘要如下：
　　 第一部分氧控制性再灌

4、注對(duì)犬體外循環(huán)肺缺血再灌注損傷的保護(hù)作用
　　 目的：探討氧控制性再灌注是否具有體外循環(huán)肺IR保護(hù)作用。
　　 方法：14只犬隨機(jī)分為對(duì)照組(ischemic reperfusion，I/R)和實(shí)驗(yàn)組(oxygencontrolled reperfusion，OCR)。兩組犬均模擬臨床體外循環(huán)過程進(jìn)行，阻斷主動(dòng)脈60min，開放主動(dòng)脈后輔助90min。其中對(duì)照組全程FiO280％，實(shí)驗(yàn)組在主動(dòng)脈開放即刻調(diào)整FiO2至40

5、％，隨后每5min依次上調(diào)10％，最后達(dá)80％。檢測(cè)麻醉后、主動(dòng)脈開放前、開放后5min、10min、15min、20min、25min以及停機(jī)前動(dòng)脈血?dú)?。在麻醉?T1)、主動(dòng)脈開放25min(T2)、主動(dòng)脈開放90min(T3)分別采取肺組織于-80℃冰箱保存，部分肺組織以10％福爾馬林溶液固定。應(yīng)用HE染色觀察肺病理變化；應(yīng)用比色法檢測(cè)肺組織髓過氧化物酶(MPO)活性。
　　 結(jié)果：所有指標(biāo)在麻醉后兩組均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。實(shí)驗(yàn)

6、組動(dòng)脈血氧分壓在主動(dòng)脈開放后5min、10min、15min、20min均明顯低于對(duì)照組。HE染色提示兩組在T2、T3時(shí)點(diǎn)肺毛細(xì)血管擴(kuò)張充血；肺泡間隔增寬、斷裂；炎癥細(xì)胞侵潤(rùn)；肺泡內(nèi)液體、白細(xì)胞、纖維素滲出等肺損傷表現(xiàn)，而實(shí)驗(yàn)組表現(xiàn)較輕。兩組MPO在T2、T3明顯升高，而實(shí)驗(yàn)組MPO在T2、T3時(shí)點(diǎn)明顯低于對(duì)照組。
　　 結(jié)論：氧控制性再灌注具有體外循環(huán)肺IR保護(hù)作用。
　　 第二部分：HMGB1信號(hào)通路在氧控制性再灌注

7、抗犬體外循環(huán)肺缺血再灌注損傷過程中的作用
　　 目的：探討HMGB1信號(hào)通路在體外循環(huán)肺IR中的作用以及氧控制性再灌注通過HMGB1信號(hào)通路抑制體外循環(huán)肺IR。
　　 方法：14只犬隨機(jī)分為對(duì)照組(I/R)和實(shí)驗(yàn)組(OCR)。兩組犬均模擬臨床體外循環(huán)過程進(jìn)行，阻斷主動(dòng)脈60min，開放主動(dòng)脈后輔助90min。其中對(duì)照組全程FiO280％，實(shí)驗(yàn)組在主動(dòng)脈開放即刻調(diào)整FiO2至40％，隨后每5min依次上調(diào)10％，最后達(dá)80

8、％。在麻醉后(T1)、主動(dòng)脈開放25min(T2)、主動(dòng)脈開放90min(T3)分別采取動(dòng)脈血離心后上清液和肺組織于-80℃冰箱保存。應(yīng)用免疫熒光、原位雜交、實(shí)時(shí)聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)、蛋白質(zhì)印跡法(western blot)以及酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)等檢驗(yàn)HMGB1、RAGE、NF-kB、白介素6(IL-6，interleukin6)、腫瘤壞死因子α(TNF-α，tumor necrosis factorα)等的表達(dá)與含量

9、。
　　 結(jié)果：所有指標(biāo)在麻醉后兩組均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。原位雜交、免疫熒光、RT-PCR、western blot提示兩組HMGB1和RAGE在T2、T3時(shí)點(diǎn)明顯增高，而實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組比較明顯降低。原位雜交提示HMGB1主要分布于肺泡上皮細(xì)胞和巨噬細(xì)胞，細(xì)胞膜、胞漿及胞核均可見表達(dá)，全程未見中性粒細(xì)胞中HMGB1陽性表達(dá)。RAGE主要分布于肺泡上皮細(xì)胞、肺間質(zhì)。western blot提示兩組NF-kB在T2、T3時(shí)點(diǎn)均增高，實(shí)驗(yàn)組

10、NF-kB在T2、T3時(shí)點(diǎn)明顯低于對(duì)照組。ELISA檢測(cè)提示兩組TNF-α和IL-6在T2、T3時(shí)點(diǎn)均增高，實(shí)驗(yàn)組IL-6及TNF-α在T2、T3時(shí)點(diǎn)明顯低于對(duì)照組。線性相關(guān)與回歸分析提示HMGB1與RAGE、HMGB1與NF-kB、RAGE與NF-kB、NF-kB與IL-6、TNF-α具有高度相關(guān)性。
　　 結(jié)論：1.HMGB1和RAGE參與體外循環(huán)肺lR病理過程。2.HMGB1和RAGE通過NF-kB介導(dǎo)調(diào)控下游IL-6和T