卵巢上皮性腫瘤中蛋白激酶C活性及α亞型的變化.pdf_第1頁
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1、中國醫(yī)科大學碩士學位論文卵巢上皮性腫瘤中蛋白激酶C活性及α亞型的變化姓名:劉川申請學位級別:碩士專業(yè):婦產(chǎn)科學指導教師:尹菊2002.9.1材料與方法一、材料:PKCa一抗及堿磷酶標記的二抗(購自Sigma公司)二、標本采集:采集中國醫(yī)科大學附屬一院和三院婦科手術切除之新鮮正常卵巢(A組)、良性卵巢上皮性腫瘤(B組)及惡性卵巢上皮性腫瘤(c組)組織標本各15例。所有標本均經(jīng)術后病理證實,并均未經(jīng)術前放療、化療及激素治療。術中取新鮮組織0

2、5克左右,立即用冷PBS沖洗,并去除壞死組織,置入液氮中,轉運至一70。C冰箱中貯存。三、方法:1、組織標本胞漿、胞膜蛋白的提?。簩嶒炈胁僮骶?“C進行。取等重的各樣品,加5倍于濕重標本的粉碎緩沖液BufferA中,以眼科剪刀剪碎組織,冰水浴下以組織勻漿機及超聲粉碎機粉碎勻漿。4。C下以13000rpm離心l小時,取其上清即為胞漿蛋白。將上述沉淀用4倍于濕重標本的胞膜蛋白提取液,超聲粉碎后4℃過夜,在4℃下以13000rpm離心1小

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