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![高羊茅組織培養(yǎng)及再生體系的建立.pdf_第1頁(yè)](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/1/8/fb75a697-cc8a-41fc-bbfd-b221e3663b4f/fb75a697-cc8a-41fc-bbfd-b221e3663b4f1.gif)
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文檔簡(jiǎn)介
1、本實(shí)驗(yàn)先后用三個(gè)高羊茅(Festuca arundinacea)品種(“滬青矮”,“Plantation”和“Ttriple A”)的成熟種子及兩個(gè)高羊茅無(wú)性系(“上農(nóng)矮生高羊茅(SACD)”和“98-19”)的幼穗、葉尖和莖節(jié)等營(yíng)養(yǎng)器官作為外植體,在Murashige and Skoog Stock(MS)培養(yǎng)基上分別添加不同濃度的2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)和6-芐氨基嘌呤(6-BA),探索其對(duì)愈傷組織的誘導(dǎo)、繼代和分化的最佳
2、濃度組合,以建立高羊茅種子和無(wú)性系的高效再生體系。 以完整種子為外植體時(shí),誘導(dǎo)愈傷組織的最佳2,4-D濃度為8 mg/L,出愈率最高達(dá)65%,;不同濃度2,4-D誘導(dǎo)愈傷組織的出愈率存在顯著差異,最佳誘導(dǎo)濃度范圍為3~11mg/L,出愈率可以達(dá)到53%~65%;品種之間的愈傷誘導(dǎo)率有顯著差異,但與2,4-D濃度之間的互作不顯著;胚性愈傷組織誘導(dǎo)率,在不同2,4-D濃度的繼代培養(yǎng)基間無(wú)顯著差異,但與誘導(dǎo)培養(yǎng)基中2,4-D濃度之間存
3、在顯著差異,由11mg/L 2,4-D的誘導(dǎo)培養(yǎng)基上所得的愈傷組織,經(jīng)繼代后的胚性愈傷組織出愈率最高達(dá)63%;2,4-D和6-BA單獨(dú)使用時(shí)對(duì)綠苗分化率的作用差異不顯著,但兩者的互作存在顯著差異,最佳分化培養(yǎng)基為MS+2,4-D 2mg/L+6-BA 1.5 mg/L,最高綠苗分化率為55%,平均綠色芽點(diǎn)數(shù)為3.6;將上述三品種成熟種子縱切,進(jìn)行愈傷誘導(dǎo),所用時(shí)間顯著縮短,最佳2,4-D濃度為2.5 mg/L,品種之間無(wú)顯著差異;在生根
4、培養(yǎng)基“1/2 MS+NAA 0.5 mg/L”上的生根率達(dá)100%。 以兩個(gè)“無(wú)性系”的營(yíng)養(yǎng)器官為外植體時(shí),發(fā)現(xiàn)幼穗(孕穗期)是誘導(dǎo)愈傷組織的最好的營(yíng)養(yǎng)器官外植體,誘導(dǎo)愈傷組織出愈率最高達(dá)94%,而幼葉尖、幼莖、幼節(jié)則未能誘導(dǎo)出愈傷組織;不同濃度2,4-D誘導(dǎo)愈傷組織的出愈率存在顯著差異,最佳誘導(dǎo)濃度范圍為7~9mg/L,出愈率可以達(dá)到90%~94%;兩無(wú)性系愈傷誘導(dǎo)率間有顯著差異,但與2,4-D濃度之間的互作不顯著;繼代培養(yǎng)
5、基以MS加入2,4-D 4 mg/L的處理方案最好,胚性愈傷組織出愈率和綠色芽點(diǎn)誘導(dǎo)率最高,分別達(dá)到98%和78%,所得的胚性愈傷組織在“MS+2,4-D 2 mg/L+6-BA 1 mg/L”分化培養(yǎng)基中的綠苗分化率也較高(57%);生根培養(yǎng)基采用“1/2 MS+NAA 0.5 mg/L”,生根率達(dá)100%。 此外,本實(shí)驗(yàn)還進(jìn)行了胚性愈傷組織在含有不同濃度的潮霉素的MS繼代培養(yǎng)基中的敏感性試驗(yàn),確定以潮霉素作為選擇抗性標(biāo)記時(shí),
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