1、研究背景：
　　肝卵圓細(xì)胞（Hepatic oval cells）是肝臟內(nèi)的祖細(xì)胞，即肝干細(xì)胞的子代細(xì)胞，其起源于肝內(nèi)的終末膽管（Canal ofHering），具有分化為成熟的肝細(xì)胞和膽管上皮細(xì)胞的能力。在嚴(yán)重的肝臟疾病肝細(xì)胞再生能力受阻時(shí)，其啟動(dòng)增殖、分化，代替肝細(xì)胞行使肝臟修復(fù)的功能。因此，闡明肝卵圓細(xì)胞增殖和分化過程中的關(guān)鍵性因素及其作用機(jī)制，對明確肝卵圓細(xì)胞與肝壞死、再生、纖維化等病理生理過程的關(guān)系，從而進(jìn)一步達(dá)到有效促

2、進(jìn)肝再生或改善移植肝細(xì)胞來源不足的問題，具有相當(dāng)重要的臨床意義。
　　基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1（stromal cell-derived factor-1，SDF-1）是肝卵圓細(xì)胞參與的肝臟再生過程中關(guān)鍵的細(xì)胞因子，其能誘導(dǎo)干細(xì)胞遷移并參與增殖過程，但其發(fā)揮作用的具體機(jī)制尚未完全明確。另一方面，轉(zhuǎn)化生長因子β（transforming growth factor-β，TGF-β）作為肝卵圓細(xì)胞增殖過程中的負(fù)向調(diào)控因子，同樣在肝再生過程中

3、發(fā)揮著重要作用。明確SDF-1對肝卵圓細(xì)胞的作用將幫助我們更好地認(rèn)識肝卵圓細(xì)胞參與的肝再生過程，為有效調(diào)節(jié)肝卵圓細(xì)胞的增殖、分化提供理論基礎(chǔ)。
　　目的：
　　探討基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1（SDF-1）在肝卵圓細(xì)胞增殖過程中的效應(yīng)、影響因素及作用機(jī)制。
　　方法：
　　1.體外培養(yǎng)大鼠肝卵圓細(xì)胞株（WB-F344），流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞表面CXCR4的表達(dá)情況。
　　2.蛋白免疫印記技術(shù)（Western Blot）

4、檢測細(xì)胞中β連環(huán)素（β-catenin）蛋白磷酸化水平。
　　3.激光共聚焦顯微鏡觀察細(xì)胞內(nèi)β連環(huán)素的分布情況。
　　4.熒光定量PCR檢測經(jīng)典Wnt通路下游基因Ccnd1、c-Myc的表達(dá)。
　　5.將細(xì)胞分為空白對照組、基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1（SDF-1）組、轉(zhuǎn)化生長因子β1（TGF-β1）組、SDF-1+TGF-β1組、SDF-1+ TGF-β1+AMD3100（CXCR4抑制劑）組，噻唑藍(lán)法檢測各組細(xì)胞增殖情況。<

5、br>　　結(jié)果
　　1.體外培養(yǎng)的WB-F344細(xì)胞中 CXCR4的表達(dá)量很低，而TGF-β1可上調(diào)WB-F344細(xì)胞CXCR4的表達(dá)（CXCR4陽性率上升39.5％）。
　　2.SDF-1可促進(jìn)TGF-β1預(yù)處理肝卵圓細(xì)胞中β-catenin的磷酸化，促進(jìn)β-catenin降解失活。
　　3.激光共聚焦顯微鏡觀察結(jié)果顯示SDF-1結(jié)合于受體CXCR4使β-catenin入核減少。
　　4.核內(nèi)β-catenin

6、減少使下游基因 Ccnd1、c-Myc的表達(dá)下調(diào)。
　　5.200μg/L的SDF-1單獨(dú)作用72 h后WB-F344細(xì)胞的增殖情況（0.512±0.010）與空白對照組（0.513±0.008）相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=0.337，P>0.05）；5μg/L的TGF-β1可輕度抑制其增殖（0.393±0.007）（t=28.001，P<0.05）；而在SDF-1+TGF-B1組中，WB-F344細(xì)胞增殖能力較TGF-β1組進(jìn)一步