1、目的：⑴檢測(cè)15種抗不動(dòng)桿菌藥物對(duì)碳青霉烯類敏感性降低鮑曼不動(dòng)桿菌(CDSAB)和對(duì)碳青霉烯類不敏感鮑曼不動(dòng)桿菌(CNSAB)的體外抗菌活性，為臨床治療該類菌感染提供依據(jù)。⑵采用多重聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)(multiplex PCR)檢測(cè)234株臨床分離的耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌攜帶OXA型碳青霉烯酶耐藥基因的情況，探討其介導(dǎo)鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)碳青霉烯類耐藥的分子機(jī)制。⑶采用脈沖場(chǎng)凝膠電泳技術(shù)(PFGE)對(duì)234株臨床分離的耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌進(jìn)行克隆株分析

2、，闡述其耐藥株的分子流行機(jī)制，為臨床有效防控提供參考依據(jù)。
　　 方法：①采用瓊脂稀釋法檢測(cè)15種抗不動(dòng)桿菌藥物對(duì)56株CDSAB和178株CNSAB的最低抑菌濃度(MIC)。②采用multiplex PCR技術(shù)檢測(cè)OXA型碳青霉烯酶耐藥基因，并對(duì)其進(jìn)行基因測(cè)序分型。③采用限制性內(nèi)切酶ApaI酶切234株CDSAB和CNSAB的染色體，PFGE對(duì)其進(jìn)行克隆株的檢測(cè)分析。
　　 結(jié)果：⑴2003年至2007年，CNSAB/

3、CDSAB分離菌株數(shù)比呈逐年上升趨勢(shì);2009年CNSAB異常增多，高達(dá)109株，占全部CNSAB的61.2％(109/178)。多粘菌素B對(duì)CDSAB和CNSAB的體外抗菌活性最高，敏感率均為100％;其次為替加環(huán)素和米諾環(huán)素，約80％的CDSAB和約95％的CNSAB對(duì)二者敏感或中介。⑵本組234株鮑曼不動(dòng)桿菌均攜帶有blaOXA-51-like基因。其中119株檢出blaOXA-23-like基因，占50.85％;105株檢出bl

4、aOXA-58-like基因，占44.87％;1株檢出blaOXA-24-like基因;4株檢出blaISAbal-OXA-51基因。OXA-58型主要集中在2003年～2004年，余年份都有檢出。OXA-23型在2005年首次發(fā)現(xiàn)，2009年檢出101株，占84.87％(101/119)。⑶本組234株鮑曼不動(dòng)桿菌共發(fā)現(xiàn)13個(gè)克隆，其中A、G、H克隆占全部菌株的91.9％。A克隆菌100株占42.7％(100/234)，2003年～2

5、009年均有檢出，主要分布于ICU（63株）等科室，對(duì)第三代頭孢菌素等耐藥率較高，對(duì)碳青霉烯類和舒巴坦耐藥率較低;G克隆菌96株占41.0％(96/234)，僅在2009年檢出，主要分布于ICU（43株）、呼吸科（27株）等科室，對(duì)碳青霉烯類、酶抑制劑復(fù)合制劑等耐藥率較高。H克隆菌在2007年發(fā)現(xiàn)，共檢出19株占8.1％(19/234)。
　　 結(jié)論：①本組2002年至2009年臨床分離的鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)碳青霉烯類耐藥率呈逐年升高

6、趨勢(shì)。多粘菌素B、替加環(huán)素和米諾環(huán)素對(duì)CDSAB和CNSAB具有較強(qiáng)的體外抗菌活性。②本組234株鮑曼不動(dòng)桿菌主要攜帶blaOXA-58-like基因和blaOXA-23-like基因，產(chǎn)OXA-58型酶菌株是我院臨床長(zhǎng)期存在的流行株，產(chǎn)OXA-23型酶菌株從2005年開(kāi)始出現(xiàn)，2009年檢出率最高。③A克隆菌是我院2003年以來(lái)的流行克隆株;G克隆菌僅出現(xiàn)在2009年，在ICU等10個(gè)科室均有發(fā)現(xiàn)，對(duì)碳青霉烯類耐藥，是造成2009年耐