1、目的：探討TNF、TNFR、sTNFRS在退變椎間盤組織中的變化規(guī)律、與疼痛的相關(guān)性、與退變的關(guān)系。 方法：患病組椎間盤突出癥患者30例，均為初次發(fā)病。椎間盤標(biāo)本取自椎間盤突出癥手術(shù)的患者，年齡在20-55歲之間。對(duì)照組8例，非突出的椎間盤標(biāo)本取自無椎間盤突出癥及椎間盤源性下腰痛的脊柱手術(shù)患者，年齡在19-40歲之間。術(shù)前檢查及術(shù)中所見，證實(shí)其不存在腰椎間盤突出癥。標(biāo)本中含有不同比例的髓核、纖維環(huán)，部分病例含有軟骨終板。采用酶聯(lián)

2、免疫吸附法(ELISA)即雙抗體夾心法檢測(cè)TNF α/β及sTNFR1/R2濃度；用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)法檢測(cè)靶細(xì)胞膜表面腫瘤壞死因子受體(TNFR1/R2mRNA)的表達(dá)。最后，應(yīng)用用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計(jì)算各指標(biāo)的均數(shù)和標(biāo)準(zhǔn)差，用方差分析法分析總體差異及各組差異。同時(shí)對(duì)所測(cè)突出腰椎間盤組織中TNF α含量與患者的臨床表現(xiàn)評(píng)分結(jié)果進(jìn)行相關(guān)性分析，應(yīng)用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)所得結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

3、 結(jié)果：TNF-α/β及sTNFR1/R2在患病組和對(duì)照組之間差異具有顯著性；突出椎間盤組織中TNF-α/β及sTNFR1/R2與患者的臨床癥狀和體征的評(píng)分結(jié)果具有明顯的正相關(guān)；患病組中TNFR1/R2mRNA的表達(dá)比對(duì)照組均顯著上調(diào)(p<0.05)。突出椎間盤組織中TNF-α/β及sTNFR1/R2和TNFR1/R2mRNA之間存在相關(guān)性。 結(jié)論： (1)本研究建立TNF及其受體的標(biāo)準(zhǔn)曲線、通過酶聯(lián)免疫反應(yīng)原理

4、及方法，可定量檢測(cè)TNF-α/β及sTNFR1/R2的含量。 (2)應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)方法證明了TNF-α/β可在椎問盤細(xì)胞中表達(dá)。 (3)組間t檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果表明，患病組突出椎間盤組織中的TNF、TNFR、sTNFRS的含量高于對(duì)照組正常椎間盤組織，提示這些物質(zhì)與腰椎間盤退變、突出的病理過程相關(guān)。 (4)TNF、TNFR、sTNFRS三者之間也存在相關(guān)性(P<0.05)，這一結(jié)果說明三者之間存在相互促

5、進(jìn)作用，同時(shí)也反映出細(xì)胞因子和炎癥介質(zhì)的生物作用不是孤立存在的，它們相互作用，密切聯(lián)系，形成復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò)性調(diào)節(jié)。 (5)直線相關(guān)統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果表明：患病組突出椎間盤中TNF-α含量的高低與患者的臨床癥狀和體征的評(píng)分結(jié)果具有明顯的正相關(guān)(P<0.01)；TNF-α在一定程度上決定著疼痛的程度。這從另一個(gè)側(cè)面說明椎間盤突出物的大小不是判斷病情輕重的根本依據(jù)，同時(shí)可以解釋巨大椎間盤突出并不一定有癥狀、劇痛的病人并不一定有明顯的神經(jīng)根受壓的