1、目的:通過體外培養(yǎng)大鼠晶狀體，探討雌激素對實驗性氧化損傷大鼠晶狀體上皮細胞凋亡的影響。 材料和方法:體外培養(yǎng)健康成年Sprsgue-Dawley(SD)大鼠晶狀體120個，分為雌、雄兩組。雌性大鼠晶狀體60個，雄性大鼠晶狀體60個，置入無酚紅DMEM培養(yǎng)液中培養(yǎng)。按培養(yǎng)液中添加的成分差異，再將兩組晶狀體分別隨機分為4組：空白對照組、17β-雌二醇(17β-E2)組、過氧化氫(H2O2)組、17β-E2+H2O2組。給予終濃度為5

2、00μmol/L的H2O2復制白內障模型，加入終濃度為8μmol/L的17β-W2干預。顯微鏡下動態(tài)觀察各組晶狀體混濁程度，并量化比較培養(yǎng)24、48、72小時后各組晶狀體混濁程度差異。分別于培養(yǎng)24、48、72小時后，在顯微鏡下撕取各組晶狀體前囊膜鋪片，采用末端脫氧核糖核酸轉移酶介導的dUTP缺口末端標記技術(TUNEL)檢測各組晶狀體上皮細胞凋亡及凋亡率。透射電子顯微鏡觀察晶狀體上皮細胞超微結構改變。 結果:實驗發(fā)現(xiàn)，終濃度為

3、500μmol/L的H2O2可誘導體外培養(yǎng)的大鼠晶狀體形成白內障，隨培養(yǎng)時間延長，晶狀體混濁程度加重。終濃度為8μmol/L的17β-E2能夠減輕雌性大鼠晶狀體混濁程度，有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，但不能減輕雄性大鼠晶狀體混濁程度(P＞0.05)。雌性大鼠晶狀體在17β-E2作用下能對抗氧化應激，減少上皮細胞凋亡率，H2O2組與17β-E2+H2O2組比較，兩組細胞凋亡率差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。17β-E2不能保護雄性大鼠晶

4、狀體對抗氧化應激，H2O2組與17β-E2+H2O2組比較，兩組細胞凋亡率差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。雌性和雄性大鼠晶狀體，空白對照組與17β-E2組比較晶狀體混濁程度和細胞凋亡率，差異均無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。培養(yǎng)72小時后晶狀體上皮細胞超微結構研究顯示，雌性H2O2組晶狀體上皮細胞絕大多數(shù)發(fā)生凋亡，呈凋亡各期形態(tài)學改變；17β-E2+H2O2組晶狀體上皮細胞部分發(fā)生凋亡；正常對照組與17β-E2組很少晶狀體上皮細胞發(fā)生凋