1、目的：通過建立大鼠糖尿病動物模型，觀察糖尿病時牙周組織中VEGF及IL-6的改變及病理變化，探討滋陰活血方劑防治作用，為臨床中藥防治糖尿病牙周炎提供理論依據(jù)。 方法：選用6月齡雄性Wistar大鼠36只，隨機分為4組：正常組(8只)、糖尿病組(10只)、糖尿病滋陰活血方劑治療組(中藥組)(9只)、糖尿病尿酸鹽治療組(西藥組)(9只)。糖尿病組、中藥組、西藥組腹腔注射STZ溶液(按45mg/kg注射)，制備糖尿病模型。正常組腹腔注

2、射生理鹽水(按45mg/kg注射)。注射后三天尾尖采血測空腹血糖，用代謝籠收集12小時尿液測定尿糖，確定造模成功。自建立糖尿病模型第1天起，中藥組每只大鼠3ml/天(含生藥1g/ml)中藥灌喂；西藥組尿酸鹽(Urate)溶液灌喂，每只大鼠20ml/天(Urate用量160mg/kg/天)；正常組和糖尿病組自由飲水。持續(xù)喂養(yǎng)3個月。在3個月時再檢測血糖、尿糖、體重一次。并將全部動物股動脈放血處死，迅速分離上頜骨，置于lO％多聚甲醛緩沖溶液

3、中固定，EDTA脫鈣，制作牙周組織切片，進行HE染色，光鏡觀察；行IL-6、VEGF免疫組織化學染色，觀察IL-6、VEGF表達并作統(tǒng)計學分析。 結果： 1糖尿病動物模型的建立； 腹腔注射STZ后第三天進行空腹血糖檢測，并用代謝籠收集12小時尿液。注射STZ大鼠空腹血糖均高于15mmol/L，尿糖+++以上，造模成功。3個月后處死動物前，測量動物空腹血糖及體重，糖尿病組、西藥組血糖明顯高于正常組和中藥組(P＜0.

4、01)，糖尿病組與西藥組血糖無明顯差異(P＞0.05)；西藥組血糖高于中藥組(P＜0.05)；中藥組血糖高于正常組(P＜0.01)。糖尿病組、中藥組、西藥組體重明顯低予正常組(P＜0.01)；糖尿病組、中藥組、西藥組三組間無明顯差異(P＞0.05)。 2大鼠牙周組織形態(tài)學觀察正常組：結合上皮附著于釉牙骨質界，與牙體組織結合牢固，溝內上皮無炎細胞浸潤；牙齦纖維及牙周膜韌帶纖維排列有序、整齊；牙槽嵴項無吸收。 糖尿病組：結合上皮附著

5、于釉牙骨質界，牙齦上皮及固有層內有大量炎細胞浸潤；膠原纖維排列紊亂，牙齦、牙周膜毛細血管數(shù)目增多、管腔擴張充血；深部固有牙槽骨、牙槽嵴項可見破骨細胞。 中藥組：結合上皮附著于釉牙骨質界，牙齦上皮及固有層內有少量炎細胞浸潤；牙齦纖維及牙周膜韌帶纖維排列有序、整齊；固有牙槽骨可見少量破骨細胞。 西藥組：與中藥組表現(xiàn)相似。 3免疫組化觀察3.1牙周組織中VEGF的表達正常組：牙周組織VEGF表達較弱。牙齦表面上皮棘層、

6、粒層及表層細胞弱陽性表達，基底細胞陰性表達，牙周膜成纖維細胞弱陽性表達，骨髓腔基質細胞陽性表達散在分布。 糖尿病組：牙周組織VEGF表達較強。牙齦表面上皮棘層、粒層及表層細胞陽性表達，基底細胞陰性表達，牙周膜成纖維細胞陽性表達，骨髓腔基質細胞強陽性表達散在分布。中藥組：牙齦表面上皮棘層、粒層、表層細胞弱陽性表達，基底細胞陰性表達，牙周膜成纖維細胞弱陽性表達，骨髓腔基質細胞陽性表達散在分布。 西藥組：與中藥組表達相似。

7、 3.2牙周組織中IL-6的表達正常組：牙齦表面上皮棘層、粒層、表層細胞弱陽性表達，牙周膜成纖維細胞弱陽性表達，骨髓腔基質細胞陽性表達散在分布。 糖尿病組：牙齦表面上皮棘層、粒層、表層細胞陽性表達，牙周膜成纖維細胞陽性表達，骨髓腔基質細胞強陽性表達散在分布。 中藥組：牙齦表面上皮棘層、粒層、表層細胞弱陽性表達，牙周膜成纖維細胞弱陽性表達，骨髓腔基質細胞陽性表達散在分布。 西藥組：牙齦表面上皮棘層、粒層、表層細

8、胞弱陽性表達，牙周膜成纖維細胞弱陽性表達，骨髓腔基質細胞陽性表達散在分布。 4半定量分析結果VEGF免疫組化平均光密度值(OD)糖尿病組低于正常組、中藥組、西藥組(P＜0.01)；正常組與西藥組、中藥組無明顯差異(P＞0.05)；西藥組與中藥組無明顯差異(P＞0.05)。 IL-6免疫組化平均光密度值(OD)糖尿病組低于中藥組(P＜0.05)、低于正常組與西藥組(P＜0.01)；中藥組低于西藥組(P＜0.05)；正常組與

9、中藥組無明顯差異(P＞0.05)；正常組與西藥組無明顯差異(P＞0.05)。結論：1.通過腹腔注射STZ建立了大鼠糖尿病模型。2.糖尿病大鼠牙周組織中VEGF及IL-6表達增強，組織形態(tài)結構發(fā)生改變，降低了牙周組織抵抗、防御細菌侵襲的能力。這種亞臨床病理改變，可能是糖尿病病人易發(fā)生牙周炎、加重牙周炎發(fā)展的因素之一。3.滋陰活血方劑與尿酸鹽均可使牙周組織中VEGF和IL-6表達趨于正常，使牙周組織形態(tài)結構的改變得以恢復。4.滋陰活血方劑可