后路手術對于大鼠后縱韌帶內骨化因子的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、后縱韌帶骨化(OssificationofthePosteriorLongitudinalLigament,OPLL)首先由Key,而后由Oppenheimer報道,1960年Tsukimoto報道后縱韌帶骨化可以引起脊髓病,該病病因不清。OPLL在頸椎最為常見,頸2—頸4水平多發(fā)。 已有的研究結果表明OPLL有基因背景的作用,如HLA基因、NPPS基因、COL6A1基因等;另外的研究集中于細胞因子方面,如骨形態(tài)發(fā)生蛋白(Bon

2、eMorphogeneticProtein,BMP)、轉化生長因子-β(TransformingGrowthFactor-β,TGF-β)、前列腺素I2(ProstaglandinI2,PGI2)、胰島素樣生長因子I(Insulin-likegrowthfactorI,IGF-I)等。要研究清楚后縱韌帶骨化的真正機制,還需要很長的過程。 BMP具有強烈的骨誘導活性,可在異位誘導新骨形成;在骨骼發(fā)育的不同階段具有一定的調節(jié)作用;它

3、可促進成骨細胞增殖和堿性磷酸酶的表達,并促進軟骨細胞蛋白多糖表達和關節(jié)軟骨缺損的修復;BMP在黃韌帶骨化和后縱韌帶骨化等疾病的發(fā)生方面具有一定的促進作用。異位軟骨內骨化中,BMP具有重要作用并在以后的病情發(fā)展中繼續(xù)發(fā)揮作用。BMP作為局部的誘導因子,可使間充質細胞向成骨細胞分化,進而誘導新骨形成。異位骨化組織內骨的沉積速度大約是正常骨的3倍,其基質和礦化物的生成速度均加快,血清堿性磷酸酶(Alkalinephosphatase,ALP)

4、的水平升高,這一點用助于異位骨化的診斷。盡管異位骨化來源的細胞在功能上類似于成骨細胞,但它們比正常成骨細胞的活性水平高,包括膠原合成和ALP活性。 近來文獻報道頸椎術后OPLL有明顯發(fā)展的跡象,例如全椎板切除,寰樞椎后路融合術后,均可加劇OPLL的發(fā)展,考慮與手術導致后結構破壞,后縱韌帶承受機械應力增加有關系。 目的 目前尚未見模擬后路手術建立的對于后縱韌帶造成機械應力刺激增加的動物模型及其相關研究。設想通過不同

5、的手術方法造成后縱韌帶的應力上升,在這一過程中檢測相關的TGF-β1及BMP的表達及含量,探討頸椎術后OPLL的發(fā)生及其發(fā)展機制;探討手術方法對OPLL發(fā)生及其發(fā)展的影響。 實驗方法 1、設立手術組與假手術組作為對照:成年健康的S-D大鼠100只,雌雄不拘,體重270-350克,隨機分為5組。3%戊巴比妥鈉30mg/kg靜脈注射麻醉。在C3、4、5、6椎體節(jié)段行手術。 (1)頸椎后路全椎板切除組。 (2)

6、頸椎后路全椎板切除+C2棘突肌肉止點切斷組。 (3)單純椎旁肌止點切斷組。 (4)假手術組,僅作切口,剝離椎旁肌暴露。 (5)對照組,不作任何處理。 2、分別于術后1周,2周,4周,8周,取實驗動物手術節(jié)段后縱韌帶標本,分別進行下列測定及檢查: (1)免疫組織化學法測定組織中TGF-β1的水平。 (2)PCR方法檢測BMP-2及BMP-7的表達水平,并且測序證實為所需的目的片段。

7、實驗結果 1.頸椎手術后,全椎板切除+肌肉切斷組BMP-2,7水平上升最明顯,與對照組比較有統(tǒng)計學差異。 2.頸椎后路全椎板切除組BMP-2,7水平水平上升,與對照組比較有統(tǒng)計學差異。 3.單純椎旁肌止點切斷組BMP-2,7水平上升,與對照組比較有統(tǒng)計學差異。 4.假手術組BMP-2,7水平與對照組比較無明顯變化。 5.各個試驗組與對照組比較TGF-β1水平無明顯差異。推論頸椎后路手術,肌肉及后結

8、構韌帶連續(xù)性的保持,對于頸椎后縱韌帶BMP-2,7表達水平影響巨大,對TGF-β1的水平早期無明顯影響;單純椎旁肌止點切斷組BMP-2,7水平上升有統(tǒng)計學差異直接證明肌肉對于維持頸椎穩(wěn)定性具有直接作用這一事實;頸椎后路全椎板切除組BMP-2,7水平有統(tǒng)計學差異,顯示頸椎棘間及棘上韌帶等后結構的連續(xù)性對于后縱韌帶BMP-2,7水平有明顯的影響;假手術組BMP-2,7水平無明顯變化說明單純手術創(chuàng)傷刺激無誘發(fā)后縱韌帶骨化的作用。 結論

9、 對于手術方法的討論建議對于孤立型的OPLL應當盡可能的采取前路手術;被迫采取頸椎后路手術時,應當盡可能保持頸椎椎旁肌的完整性,盡量保留棘間及棘上韌帶,預防頸椎術后誘發(fā)或加重OPLL的可能。如果必須擴大減壓范圍,為了防止可能發(fā)生的OPLL的術后加重和發(fā)展,可以考慮施行后路的頸椎內固定,保持頸椎的弧度,減少后縱韌帶的張力,從而防止OPLL術后的發(fā)生和發(fā)展。 研究認為:BMP-2,7對于OPLL發(fā)生及其發(fā)展的早期階段具有主要

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