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文檔簡介
1、目的:妊娠期高血壓疾病(hypertensive disorders complicating pregnancy, HDCP)是妊娠期的特有疾病,在我國平均發(fā)病率為9.40%,嚴(yán)重威脅母嬰的生命安全,但其確切病因及發(fā)病機(jī)制至今未能闡明,一直是婦產(chǎn)科領(lǐng)域的重要研究課題。熱休克蛋白(heat shock protein,HSP)90是熱休克蛋白家族中重要的成員之一,是存在于真核生物和細(xì)菌中的一種基本的重要的分子伴侶,作為特異分子伴侶的HS
2、P90參與多種信號途徑中的激酶、核受體和p53等轉(zhuǎn)錄因子活性的調(diào)節(jié),在細(xì)胞生長發(fā)育、分化、蛋白質(zhì)合成、折疊運(yùn)輸和分解、細(xì)胞骨架的功能、膜功能以及應(yīng)激條件下對細(xì)胞的保護(hù)等生理代謝中起著重要的生物學(xué)作用。但目前尚無HSP90在妊娠期高血壓疾病中的研究報道。本課題旨在探討熱休克蛋白90與妊娠期高血壓疾病發(fā)生的關(guān)系,以及為病情嚴(yán)重程度的判定奠定基礎(chǔ),探索妊娠期高血壓疾病的
,以便為更好的防治本病,降低圍產(chǎn)期母兒死亡率。
3、 方法:資料來源:選自在河北省石家莊市第四醫(yī)院2009年10月至2010年10月住院分娩的產(chǎn)婦共150例,所有病例均為初次分娩且為剖宮產(chǎn)。按照第七版《婦產(chǎn)科學(xué)》妊娠期高血壓疾病的診斷標(biāo)準(zhǔn)分為四組:第1組正常孕婦30例;第2組妊娠期高血壓孕婦40例;第3組輕度子癇前期孕婦40例;第4組重度子癇前期40例。四組之間年齡、孕周、體重、孕產(chǎn)次均無統(tǒng)計學(xué)差異。所有研究對象晨起空腹采肘靜脈血2ml,分娩時采臍靜脈血2ml,離心10m后取上清液,-8
4、0℃保存,待行ELISA檢測HSP90含量。取行剖宮產(chǎn)孕婦于胎盤娩出后即刻,避開壞死和鈣化區(qū)域,取胎盤組織塊大小為1×1×1cm3,立即將組織置入-196℃液氮罐內(nèi)冷凍保存,準(zhǔn)備進(jìn)行定量聚合酶鏈反應(yīng)(Real-timePCR)和Westernblot檢測HSP90基因和蛋白表達(dá)。
結(jié)果:
1.一般情況妊娠期高血壓組、輕度子癇前期組、重度子癇前期組患者既往均無高血壓、心臟病、糖尿病、肝腎疾病、血栓性疾病、自身免
5、疫性疾病。此次妊娠不合并其他疾病。正常妊娠組孕婦BP<140/90mmHg,尿蛋白(-),無妊娠合并癥及并發(fā)癥,既往無自身免疫性疾病和反復(fù)流產(chǎn)、死胎病史。四組孕婦的一般情況比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
2.在正常妊娠組、妊娠期高血壓組、輕度子癇前期組、重度子癇前期組靜脈血中HSP90水平分別為0.63±0.35,0.91±0.38,1.35±0.42,1.79±0.43(ng/ml),均較正常組明顯升高,且均隨
6、著病情的加重逐漸升高(p<0.01)。而且妊娠期高血壓組與正常妊娠組、輕度子癇前期組與妊娠期高血壓組、重度子癇前期組與輕度子癇前期組比較均有極顯著統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.01)。
3.正常組、妊娠期高血壓組、輕度子癇前期組、重度子癇前期組臍帶血中HSP90水平分別為0.21±0.07,0.23±0.12,0.27±0.09,0.44±0.15(ng/ml),可以看出,四組中除妊娠期高血壓組和輕度子癇前期組之間無明顯差異外(P>
7、0.05),妊娠期高血壓組與正常妊娠組,重度子癇前期組與輕度子癇前期組兩兩比較均有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05),且重度子癇前期組與其它三組之間有極顯著差異(P<0.01).
4.Western blotting實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,HSP90在妊娠期高血壓組、輕度子癇前期組、重度子癇前期組胎盤中的蛋白和基因表達(dá)明顯強(qiáng)于正常組,且呈現(xiàn)出逐漸加強(qiáng)的趨勢,有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.01)。
5.RT-PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,HSP9
8、0在妊娠期高血壓組、輕度子癇前期組、重度子癇前期組胎盤中的蛋白和基因表達(dá)明顯強(qiáng)于正常組,且呈現(xiàn)出逐漸加強(qiáng)的趨勢,有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.01)。
6.直線相關(guān)分析:HSP90在外周血、臍帶血及胎盤中的表達(dá)與疾病的嚴(yán)重程度呈正相關(guān)(P<0.01)。
結(jié)論:HSP90的升高可能與妊娠期高血壓疾病的發(fā)生和發(fā)展有非常密切的關(guān)系,可以通過檢測外周血中HSP90的水平判斷和預(yù)測病情的嚴(yán)重程度。通過監(jiān)測臍血和胎盤組織中HSP
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