大鯢蛙病毒感染大鯢的組織嗜性、病理損傷及對MHC類基因表達量影響的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、為研究大鯢蛙病毒(CGSRV)感染大鯢的組織嗜性、動態(tài)病理損傷及對MHC基因表達量的影響,以1.0×106.5TCID50ml-1濃度的CGSRV腹腔注射感染大鯢(體重280.3±20.2g,體長33.9±2.3cm),在感染的0d、3d、5d、7d、9d、13d、16d隨機剖殺3尾,采取肝、腎、脾、肺、腸、皮膚肌肉、腦、心和胃等組織,石蠟切片和HE染色對CGSRV感染大鯢的病理損傷過程進行觀察,qPCR技術對病毒的組織嗜性及動態(tài)定量分

2、布進行研究。結果顯示感染大鯢的臨床特征為體表黏液分泌增多,食欲下降甚至廢絕,四肢與頭部腫脹,皮膚肌肉出血、潰爛等。剖檢發(fā)現(xiàn),感染后3d肝、脾、腎腫大;7-9d出現(xiàn)腹水,胃腸道空虛,肺出血,脾局灶性壞死;13-16d肝腫大、淤血,呈花斑狀,脾多灶性壞死,腎腫大、點狀出血,胃腸道內(nèi)充滿淡黃色粘稠物。病理組織學上,CGSRV感染導致大鯢多組織、器官損傷,其中肝、脾、腎和皮膚肌肉病變嚴重,為損傷靶器官,且在一些損傷的細胞內(nèi)見嗜堿性或嗜酸性包涵體

3、。感染后3d肝細胞與腎小管上皮細胞變性,腎間以及肝小葉中央靜脈周圍淋巴細胞和嗜酸性粒細胞浸潤;5-7d實質(zhì)性器官變性、壞死、炎癥加重,胃腸道呈卡他性炎。9d表皮細胞壞死、脫落,肌纖維變性、壞死。13-16d肝廣泛變性、壞死與炎癥,脾淋巴細胞數(shù)量顯著減少,腎小球滲出性-壞死性炎,皮膚肌肉呈出血性-壞死性炎和實質(zhì)性心肌炎。SYBRGreen qPCR結果顯示,整個感染進程中各組織CGSRV含量呈上升趨勢,不同組織病毒量在7.89×102-4

4、.61×108copies/ug DNA之間,其中肺、腸、肝、脾、腎和皮膚肌肉含量高,表明CGSRV具有廣泛的組織嗜性,但肝、脾、腎、皮膚肌肉為其復制和損傷的靶器官,且病毒分布量與病理損傷呈正相關。
  采用qPCR技術在CGSRV感染大鯢的0d、3d、5d、7d、9d、13d、16d對大鯢肝、脾、腎、腸、胃、皮膚、肺、肌肉等組織、器官中MHCⅠ和MHCⅡ類基因的表達影響進行了研究。結果顯示,CGSRV感染能引起所有被檢組織中MH

5、CⅠ、ⅡA和ⅡB基因表達變化,其中MHC1和MHCⅡA基因表達量高,與0d表達量差異顯著,MHCⅡB基因表達量變化較小,但上述3種MHC基因都呈先上升后降低趨勢,具有時間依賴性和組織差異性。感染后3d,肝、脾、腎、肺與腸中3種MHC基因極顯著上調(diào)(P<0.01),5-9d相繼上調(diào)到最大值,隨后下降。感染后5-7d,皮膚肌肉出現(xiàn)上調(diào)(P<0.01),達峰值后出現(xiàn)下降趨勢,且表達量豐富,直到16d基因表達量仍顯著高于其他各組織表達水平。結果

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