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文檔簡介
1、藥用植物紅花綠絨蒿生長于高海拔地區(qū),而四川阿壩州生態(tài)環(huán)境特殊適合微生物生長,本研究旨在探究紅花綠絨蒿內(nèi)生及根際土壤放線菌的多樣性及群落結(jié)構(gòu)。從阿壩州6個不同地理位置采集紅花綠絨蒿樣品,表面消毒后通過可培養(yǎng)和免培養(yǎng)方法對植物內(nèi)生及根際放線菌多樣性進行研究,研究結(jié)果表明:
(1)放線菌的分離受多種因素影響,土壤導電率低于1的樣品分離的數(shù)量最少;土壤有機質(zhì)與放線菌分離數(shù)量在一定范圍內(nèi)呈正相關(guān)關(guān)系;采樣海拔與內(nèi)生放線菌和根際土壤放線菌
2、分布呈正相關(guān)和負相關(guān)關(guān)系。本研究中培養(yǎng)基分離得到的放線菌數(shù)量存在明顯差異,10種不同的培養(yǎng)基分離得到的放線菌存在明顯差異,其中高氏一號培養(yǎng)基和改良脯氨酸培養(yǎng)基分離到的內(nèi)生放線菌最多,最少的是甲殼素培養(yǎng)基;在根際土壤放線菌分離中,高氏一號分離到的數(shù)量最多,甲殼素、SCN和腐殖酸培養(yǎng)基分離到的最少,從中可以看出高氏一號在兩者之間都是分離效果最好的;在紅花綠絨蒿各組織中內(nèi)生放線菌分離的數(shù)量表明根(18)>葉(17)>莖(9)>花(8)。
3、> (2)選擇7種放線菌表形特征結(jié)合加權(quán)計算對紅花綠絨蒿放線菌多樣性進行初探,篩選出56株進行深入研究,通過ARDRA-RLFP和PCR-BOX分析表明,32株內(nèi)生放線菌和24株根際放線菌具有一定差異,其多樣性較為豐富但簇群分布不均勻。對代表菌株測序并構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹可知,測序菌株包括鏈霉菌屬(Streptomyces)、北里孢菌屬(Kitasatospora)、厄氏菌屬(Oerskovia)及分類到綱的稀有放線菌SCAUEjDS1,其
4、中鏈霉菌屬為優(yōu)勢菌群占總數(shù)的78%,且莖中分離的放線菌多樣性最好。
(3)經(jīng)過PCR-DGGE技術(shù)分析表明,不同地理位置的紅花綠絨蒿,根的多樣性指數(shù)為:A>F>E>D>C>B(A為松潘尕力臺海拔3553m;B為紅原安曲鄉(xiāng)海拔3523m;C為馬爾康夢筆山海拔3894m;D為小金縣海拔3789m;E為小金縣巴郎山海拔4120m;F為小金縣海拔4114m,下同);莖的多樣性指數(shù)為:A>D>E>B>C>F;葉的多樣性指數(shù)為:A>B>D
5、>C>E>F;花的多樣性指數(shù)為:B>D>E>C>F>A。而同一地理位置紅花綠絨蒿組織之間的多樣性指數(shù)為松潘尕力臺:莖>葉>根>花;紅原安曲鄉(xiāng):花>葉>莖>根;馬爾康夢筆山:葉>花>莖>根;小金縣(海拔3789m):花>莖>葉>根;小金縣巴郎山:莖>花>葉>根;小金縣(海拔4114m):莖>根>葉>花。6地根際土壤放線菌多樣性指數(shù)為:E>D>A>F>C>B。通過測序條帶系統(tǒng)發(fā)育發(fā)現(xiàn)紅花綠絨蒿內(nèi)生放線菌可分為8簇遺傳群落,紅球菌屬(Rhod
6、ococcus)為優(yōu)勢菌群占總數(shù)的65%,其余還包括棒桿菌屬(Corynebacterium)、諾卡氏菌屬(Nocardia)、微球菌屬(Micrococcus)、棲霉菌屬(Mycetocola)、微桿菌屬(Microbacterium)假諾卡氏菌屬(Pseudonocardia)和鏈霉菌屬(Streptomyces)。紅花綠絨蒿不同組織中內(nèi)生放線菌的種群分布為:莖(5個)>根、葉(3個)>花(2個);不同地理位置紅花綠絨蒿內(nèi)生放線菌分
7、布情況為:紅原安曲鄉(xiāng)(3523m),小金縣巴郎山(4120m),小金縣(4114m)種群分布最多3個屬,松潘尕力臺(3553m),馬爾康夢筆山(3894m)分布兩個屬,小金縣(3789m)分布一個屬。
可培養(yǎng)和免培養(yǎng)結(jié)合能更全面了解紅花綠絨蒿內(nèi)生放線菌多樣性。該研究表明紅花綠絨蒿根莖葉花組織中放線菌具有豐富的多樣性,其組織內(nèi)分布的放線菌種類及其次級代謝產(chǎn)物都有很大的利用價值和潛在的經(jīng)濟價值,研究和利用阿壩地區(qū)綠絨蒿內(nèi)生放線菌資
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