丹紅注射液對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷后Hsp20及GFAP表達(dá)的影響.pdf_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、目的:研究大鼠腦缺血再灌注損傷及丹紅注射液干預(yù)后Hsp20和GFAP的表達(dá)變化及相應(yīng)的保護(hù)機(jī)制。
   方法:采用大腦中動(dòng)脈閉塞(MCAO)方法制作大鼠腦缺血再灌注模型;112只大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組(N)、假手術(shù)組(S)、缺血再灌注組(I/R)和丹紅注射液干預(yù)組(DI/R),缺血再灌注組和丹紅注射液干預(yù)組再分別分為測(cè)腦梗死體積組和免疫組化組;丹紅注射液干預(yù)組從實(shí)驗(yàn)前一天開(kāi)始腹腔注射丹紅注射液(8ml/kg,Qd),缺血再灌注損

2、傷組在相同時(shí)間點(diǎn)注射生理鹽水;正常組直接處死;假手術(shù)組、測(cè)腦梗死體積組于24小時(shí)后處死,TTC染色評(píng)價(jià)大鼠腦梗死體積;缺血再灌注組、丹紅干預(yù)組中免疫組化組分別在缺血2小時(shí)后再灌注,并于再灌注后(I/R)6小時(shí)(6h)、24小時(shí)(24h)、48小時(shí)(48h)、72小時(shí)(72h)、7d(7天)的各時(shí)間點(diǎn)分批處死動(dòng)物,快速取腦組織制作標(biāo)本,采用HE染色觀察病理變化;免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)各組大鼠腦內(nèi)Hsp20、GFAP的表達(dá)情況;各組大鼠在處死

3、前行神經(jīng)功能缺損評(píng)分;采用SPSS17.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
   結(jié)果:
   1.除缺血再灌注6小時(shí)外的其余各時(shí)間點(diǎn),丹紅干預(yù)組大鼠神經(jīng)功能缺損小于缺血再灌注組(P<0.05),且丹紅干預(yù)組同一組別比較,缺血再灌注時(shí)間越長(zhǎng),神經(jīng)功能缺損程度越輕(P<0.05)。
   2.丹紅干預(yù)組腦梗死體積明顯小于腦缺血再灌注組(P<0.05)。
   3.光鏡下HE染色海馬區(qū)CA1區(qū)可見(jiàn)丹紅干預(yù)組較缺血再灌注組變性壞

4、死明顯縮小,病理?yè)p傷輕。且丹紅干預(yù)組同一組別比較,缺血再灌注時(shí)間越長(zhǎng),病理?yè)p傷越輕。
   4.免疫組化顯示:
   (1)Hsp20陽(yáng)性表達(dá)位于腦皮質(zhì)神經(jīng)元、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞胞漿及腦血管內(nèi)皮細(xì)胞。正常對(duì)照組和假手術(shù)對(duì)照組中Hsp20陽(yáng)性細(xì)胞很少,兩組比較無(wú)差別(P>0.05);缺血再灌注組中I/R6h組Hsp20的表達(dá)開(kāi)始迅速增加,I/R24h時(shí)Hsp20表達(dá)仍明顯增加,I/R72h時(shí)Hsp20表達(dá)增加達(dá)到高峰,I/R7d

5、表達(dá)減少。
   (2)丹紅干預(yù)后相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)Hsp20表達(dá)趨勢(shì)同缺血再灌注組,但陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)明顯高于缺血再灌注組,相同時(shí)間點(diǎn)比較,差異有顯著性(P<0.05)。
   (3)GFAP表達(dá)于星形膠質(zhì)細(xì)胞的細(xì)胞漿或者突起,呈棕黃色。正常對(duì)照組和假手術(shù)對(duì)照組神經(jīng)細(xì)胞中GFAP陽(yáng)性細(xì)胞較少,兩組比較無(wú)差別(P>0.05);缺血再灌注組中I/R6h組GFAP的表達(dá)開(kāi)始增加,I/R24h時(shí)GFAP表達(dá)明顯增加,I/R72h時(shí)GFAP表

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