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1、背景:血管內(nèi)皮細(xì)胞功能紊亂是代謝綜合征(metabolic syndrome, MS)的一個(gè)重要特征,而抵抗素(resistin, Re)為新近發(fā)現(xiàn)的脂肪細(xì)胞因子,在代謝綜合征發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中起重要的調(diào)控作用,抵抗素可能促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞功能紊亂。目前已證實(shí)一氧化氮(nitric oxide, NO)及環(huán)磷腺苷(cyclic adenosine monophosphate, Camp)在維持正常的血管內(nèi)皮功能中起重要作用。
2、目的:本研究主要觀察抵抗素對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(human umbilical veinendothelial cells, HUVECs)內(nèi)NO的分泌及Camp水平的影響,探討其對(duì)血管內(nèi)皮功能調(diào)節(jié)的作用機(jī)制。
方法:(1)體外培養(yǎng)HUVECs,取4-6代細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。培養(yǎng)的HUVECs 接種于96 孔板,生長(zhǎng)至80%以上融合狀態(tài),將細(xì)胞分為3 組:Ⅰ組為單純培養(yǎng)基對(duì)照組,Ⅱ組為50ng/ml 抵抗素組,Ⅲ組為20ng/ml
3、 腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)組。加入上述試劑處理12 小時(shí)后,取上清液離心去除細(xì)胞碎片,硝酸還原酶法測(cè)定NO含量。
(2)體外培養(yǎng)HUVECs,取4-6代細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。培養(yǎng)的HUVECs 接種于細(xì)胞培養(yǎng)瓶中,生長(zhǎng)至80%以上融合狀態(tài),分組同上。加入上述試劑處理培養(yǎng)6小時(shí)后,提取蛋白,ELISA法測(cè)定Camp含量。
結(jié)果:(1)與單純培養(yǎng)基對(duì)照組相比,抵抗素組
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