1、研究目的:第一部分:分析巨噬細(xì)胞J774.16對(duì)新生隱球菌野生株B3501、莢膜突變株Cap60及白化株Mel-的存活力和出芽繁殖能力的影響.第二部分:分析巨噬細(xì)胞J774.16對(duì)新生隱球菌野生株B3501、莢膜突變株Cap60及白化株Mel-的凋亡和細(xì)胞周期的影響.第三部分:研究巨噬細(xì)胞對(duì)新生隱球菌野生株B3501的基因表達(dá)影響.第四部分:研究巨噬細(xì)胞對(duì)新生隱球菌野生株B3501的主要毒性基因表達(dá)影響.結(jié)論:第一部分:J774.16細(xì)

2、胞對(duì)新生隱球菌野生株B3501、莢膜缺陷株Cap60及白化株Mel-均有較強(qiáng)的吞噬能力,其中尤其對(duì)白化株Mel-更明顯,而對(duì)B3501的吞噬指數(shù)最低,但其出芽率明顯比其它兩者高,莢膜和產(chǎn)黑素這兩種毒性因子是新生隱球菌在J774.16細(xì)胞內(nèi)存活和生長(zhǎng)繁殖不可缺少的條件.巨噬細(xì)胞對(duì)Cap60和Mel-株的存活力和繁殖能力的影響更大.第二部分:新生隱球菌與巨噬細(xì)胞J774.16共孵育后,與野生株相比,巨噬細(xì)胞對(duì)不同的突變株新生隱球菌的凋亡率影

3、響更明顯;其增殖也受到不同程度的抑制,而其中巨噬細(xì)胞對(duì)新生隱球菌的細(xì)胞周期影響以白化株Mel-最為明顯.巨噬細(xì)胞對(duì)不同新生隱球菌的活力有不同的影響.第三部分:巨噬細(xì)胞吞噬后,新生隱球菌的細(xì)胞增殖和周期變化與ADK1、CYR1表達(dá)上調(diào)有關(guān);出芽率的下降與ISC10表達(dá)下調(diào)有關(guān);細(xì)胞的活力下降則與離子轉(zhuǎn)運(yùn)、三羧酸循環(huán)中蛋白酶及一些具有ATPase活性的蛋白質(zhì)基因表達(dá)的下降有關(guān);對(duì)于新生隱球菌在巨噬細(xì)胞內(nèi)的存活則與這些基因的變化及某些目前尚未