1、近年來(lái)研究表明，心肌缺血再灌注損傷的主要機(jī)制之一是過(guò)度的炎癥反應(yīng)，在心肌缺血再灌注損傷的過(guò)程中炎性細(xì)胞因子大量釋放并發(fā)揮重要的作用。而NF—κB信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路參與介導(dǎo)細(xì)胞增殖、炎癥、凋亡等多種生理過(guò)程，對(duì)于心肌缺血再灌注損傷的發(fā)生、發(fā)展具有關(guān)鍵作用。因此，本研究以心肌缺血再灌注損傷中炎癥反應(yīng)過(guò)程為研究主線，NF—κB信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路為切入點(diǎn)，以溫陽(yáng)益心活血化痰法為干預(yù)手段，從細(xì)胞及分子生物學(xué)水平揭示溫陽(yáng)益心活血化痰法對(duì)心肌缺血再灌注損傷的抗炎

2、效應(yīng)及作用靶點(diǎn)，為優(yōu)化治療方案，提高臨床療效提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 目的：探討溫陽(yáng)益心活血化痰法對(duì)心肌缺血再灌注后NF—κB信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的干預(yù)作用，明確本法對(duì)心肌缺血再灌注炎癥損傷的具體作用靶點(diǎn)，闡明其抗炎作用機(jī)理。
　　 方法：通過(guò)結(jié)扎大鼠心臟左前降支動(dòng)脈建立心肌缺血再灌注損傷動(dòng)物模型，運(yùn)用透射電鏡觀察心肌組織超微結(jié)構(gòu)改變；全自動(dòng)分析儀連續(xù)監(jiān)測(cè)法檢測(cè)大鼠血清LDH—L、CK水平；免疫印跡(western—blot)法檢測(cè)

3、心肌NIK、IKKβ、IκBα蛋白表達(dá)；采用逆轉(zhuǎn)錄.聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT—PCR)及免疫組化法檢測(cè)心肌NF—κ
　　 Bp65mRNA及蛋白表達(dá)；酶聯(lián)免疫吸試驗(yàn)(EL，ISA)測(cè)定血清IL—1β、IL—6及IL—10的含量；利用免疫組化方法觀察心肌TNF—α和ICAM—1蛋白表達(dá)。
　　 結(jié)果：①溫陽(yáng)益心活血化痰法指導(dǎo)下創(chuàng)立的溫心方可以顯著改善心肌超微結(jié)構(gòu)損傷，抑制LDH—L、CK的生成和釋放，降低再灌注后心律失常發(fā)生率

4、，對(duì)心肌缺血再灌注損傷有保護(hù)作用；②溫心方能夠抑制再灌注后心肌NIK、IKKβ表達(dá)，并同時(shí)上調(diào)IκBα蛋白表達(dá)，與模型組比較有顯著性差異(P<0.01)；③溫心方能明顯抑制心肌NF—κBp65mRNA及蛋白表達(dá)，阻止其核移位，與模型組相比統(tǒng)計(jì)學(xué)有顯著性差異(P<0.01)；④溫心方能顯著降低NF—κB調(diào)控的下游炎性細(xì)胞因子IL—1β、IL—6及TNF—α、ICAM—1的含量，并促進(jìn)抑炎因子IL—10的表達(dá)，各項(xiàng)指標(biāo)與模型組相比均有顯著性