1、上海交通大學博士學位論文熱刺激條件下血管內(nèi)皮細胞的形態(tài)變化及凋亡研究姓名：周鳴杰申請學位級別：博士專業(yè)：生物醫(yī)學工程指導教師：徐學敏20080101摘要粒轉染血管內(nèi)皮細胞后建立單克隆細胞系，利用該細胞系及激光共聚焦熒光顯微鏡對血管內(nèi)皮細胞進行實時觀察，研究了加熱過程中血管內(nèi)皮細胞細胞骨架的實時變化。結果表明，細胞微絲骨架的變化與其形態(tài)以及細胞之間連接的變化幾乎是同步發(fā)生的，說明了血管內(nèi)皮細胞形態(tài)以及細胞之間連接發(fā)生變化的內(nèi)在原因是細胞內(nèi)

2、微絲骨架受熱發(fā)生了解聚。熱療結合化療除了對腫瘤細胞有殺傷作用外，其對血管內(nèi)皮細胞的直接殺傷作用也是熱療增強療效的重要機制。我們進一步研究了熱刺激以后血管內(nèi)皮細胞的損傷，結果顯示血管內(nèi)皮細胞在450c／j口熱以后，細胞的表面出現(xiàn)了大量凋亡小體。我們又用熒光雙染色的方法定量分析了血管內(nèi)皮細胞在不同溫度下細胞存活率、凋亡率和壞死率隨時間變化的情況，結果表明血管內(nèi)皮細胞死亡的模式與溫度的高低密切相關：當溫度低于45。C時，細胞的死亡模式以發(fā)生凋

3、亡為主，而當溫度大于45。C時，細胞的死亡模式以壞死為主。已有的研究發(fā)現(xiàn)熱刺激以后腫瘤環(huán)境下的血管內(nèi)皮細胞比正常血管內(nèi)皮細胞死亡率更高，對熱的刺激更加敏感。我們通過進一步的實驗證明溫度處于43—45℃時，腫瘤環(huán)境下的血管內(nèi)皮細胞凋亡率要大于正常血管內(nèi)皮細胞。除了本研究所涉及的熱刺激引起血管內(nèi)皮細胞微絲骨架以及細胞發(fā)生凋亡、壞死的研究，已有的一些研究還對熱刺激過程中血管內(nèi)皮細胞胞內(nèi)鈣離子濃度以及熱激蛋白(HSP)水平變化等細胞水平的現(xiàn)象進