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![體細(xì)胞核移植來(lái)源的克隆胚胎線(xiàn)粒體定量分析.pdf_第1頁(yè)](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/19/13/c546ea37-e2da-4b11-b043-b8d1ce3d647a/c546ea37-e2da-4b11-b043-b8d1ce3d647a1.gif)
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1、人胚胎干細(xì)胞可在體外無(wú)限增殖,并具有分化為人體任何細(xì)胞類(lèi)型的潛力。因此它可以作為將來(lái)制造人體所需要的細(xì)胞、組織和器官的種子細(xì)胞。天然或IVF來(lái)源的胚胎干細(xì)胞所獲得的種子細(xì)胞,由于組織不相容性使病人機(jī)體會(huì)產(chǎn)生免疫排斥反應(yīng),應(yīng)用免疫抑制劑則有一定毒性且價(jià)格昂貴。為解決這一技術(shù)難題,我們研究團(tuán)隊(duì)進(jìn)行了體細(xì)胞核移植克隆胚胎技術(shù)研究(也稱(chēng)治療性克?。?。 體細(xì)胞核移植克隆技術(shù),能將成熟的體細(xì)胞轉(zhuǎn)化為原始的胚胎細(xì)胞,這一復(fù)雜的演變過(guò)程,主要是
2、在去核的卵細(xì)胞內(nèi)微環(huán)境中進(jìn)行基因重編程,是治療性克隆研究中的一項(xiàng)重要科學(xué)問(wèn)題。供體細(xì)胞和受體卵細(xì)胞的線(xiàn)粒體在核質(zhì)之間協(xié)調(diào)互作中扮演著重要角色。為此研究核移植來(lái)源克隆胚胎早期發(fā)育過(guò)程中供體細(xì)胞和受體卵細(xì)胞線(xiàn)粒體的動(dòng)態(tài)變化規(guī)律,為進(jìn)一步了解其機(jī)理奠定基礎(chǔ)。本研究采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法檢測(cè)核移植來(lái)源克隆胚胎中供體細(xì)胞和受體卵細(xì)胞線(xiàn)粒體動(dòng)態(tài)變化。首先進(jìn)行動(dòng)物克隆胚胎實(shí)驗(yàn),再進(jìn)行動(dòng)物與人之間的克隆胚胎實(shí)驗(yàn),最終進(jìn)行完全人類(lèi)克隆胚胎實(shí)驗(yàn),其結(jié)果
3、如下: 1.利用基因克隆技術(shù),分別克隆了一個(gè)含有人、兔和小鼠線(xiàn)粒體基因片段的質(zhì)粒,并將它作為外標(biāo)準(zhǔn)品,建立了線(xiàn)粒體SYBR Green I熒光染料實(shí)時(shí)定量PCR方法。 2.人-兔重構(gòu)胚胎從1-細(xì)胞階段到桑椹胚階段,人和兔的mtDNA是共存狀態(tài)。到了核移植囊胚階段,受體兔線(xiàn)粒體大量增殖,而且盡管在囊胚時(shí)期,供體細(xì)胞mtDNA降到極低值,但他們依然存在。 3.在小鼠-兔核移植胚胎mtDNA拷貝數(shù)從1-細(xì)胞階段到桑椹胚
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