1、黃瓜(Cucumis sativus L.)是我國和世界的主要蔬菜之一。隨著黃瓜基因組測(cè)序工作的完成，人們掌握了大量的黃瓜轉(zhuǎn)錄組、表達(dá)譜數(shù)據(jù)和眾多的基因資源，目前正在對(duì)基因功能進(jìn)行分析。鑒于黃瓜轉(zhuǎn)基因效率較低，為了盡早確定基因的功能，人們多選擇擬南芥或煙草作為受體對(duì)黃瓜的基因功能進(jìn)行分析，這在很大程度上延緩了人們對(duì)于黃瓜基因功能及其作用機(jī)制的理解，進(jìn)而在一定程度上也延緩了黃瓜分子育種的速度。據(jù)上述現(xiàn)狀，結(jié)合目前黃瓜基因組信息已知，甲基磺

2、酸乙酯誘變(Ethyl methane sulfonate，EMS)結(jié)合反向遺傳學(xué)定向誘導(dǎo)基因組局部突變(Targeting Induced Local Lesions In Genomes，TILIING)技術(shù)進(jìn)行覆蓋整個(gè)黃瓜基因組的相關(guān)突變體庫構(gòu)建以及進(jìn)行基因功能研究可以作為當(dāng)前黃瓜轉(zhuǎn)基因效率較低的一個(gè)有效的補(bǔ)充手段，加速黃瓜分子育種研究的進(jìn)程。
　　本研究選用東北農(nóng)業(yè)大學(xué)黃瓜課題組提供的黃瓜649為材料，利用EMS誘變技術(shù)，

3、創(chuàng)制黃瓜突變體庫，結(jié)合TILLING技術(shù)，選取黃瓜雌性基因F（CsA CS1G）、苦味基因Bt、以及本課題組前期獲得耐低氮相關(guān)基因CsNAC作為靶基因進(jìn)行TILLING平臺(tái)構(gòu)建及突變體篩選。主要研究結(jié)果如下:
　　(1)本研究通過5組EMS濃度梯度（0.5％、1％、1.5％、2％和2.5％）誘變黃瓜649種子，根據(jù)出苗率等綜合考慮采用1.5％和2％ EMS濃度誘變黃瓜種子創(chuàng)制黃瓜突變體庫，經(jīng)過兩代自交，最終獲得421個(gè)M2家系和1

4、807份M3種子;M1和M2植株表型突變頻率分別為19.2％和15.2％;此外在M2代表型鑒定中獲得一些重要突變性狀，例如少果刺突變體、果皮顏色突變體、短瓜突變體、圓葉突變體、無花突變體、矮化突變體、葉緣失綠突變體、長葉突變體、長瓜突變體、葉片皺縮突變體和植株全雄花突變體等。
　　(2)本研究將每個(gè)M2代家系取樣6-8株混合后提取其DNA，然后將標(biāo)準(zhǔn)化后的DNA每8個(gè)家系組建一個(gè)8倍池，獲得53個(gè)DNA池。以黃瓜雌性F基因(Csa