1、研究目的 長期職業(yè)接觸正己烷、CS<,2>可引起以感覺運動型周圍神經(jīng)病為主要I臨床特征的慢性中毒。早期表現(xiàn)為手足部感覺異常，痛覺、觸覺減退呈手套、襪套樣分布，進一步發(fā)展可表現(xiàn)為四肢無力、行走困難以至癱瘓。主要的病理改變發(fā)生在肢體遠端最長、最粗的感覺和運動神經(jīng)軸索，并在郎飛氏節(jié)附近形成巨大的充滿神經(jīng)絲(neurofilament，NF)的腫脹，郎飛氏節(jié)解剖結(jié)構(gòu)扭曲且髓鞘從腫脹處回縮，有時伴有節(jié)段性脫髓鞘，最后軸索發(fā)生變性。

2、 研究方法 1雄性Wistar大鼠用400 mg/kg.bw的HD腹腔注射染毒，染毒時間分別為2、4和8周，建立正己烷中毒性周圍神經(jīng)病模型，并取一半8周染毒動物繼續(xù)觀察至24周。雄性Wistar大鼠分別用300、500 mg/kg.bw的CS<,2>灌胃染毒，連續(xù)12周，建立CS<,2>中毒性周圍神經(jīng)病模型。 2 取大鼠大腦、脊髓和坐骨神經(jīng)組織制備勻漿，100，000 xg、4℃離心60 min。利用Western-Blotti

3、ng技術研究大鼠大腦、脊髓、坐骨神經(jīng)上清和沉淀中NF-H、NF-M、NF-L、α-tubulin、β-tubulin和β-actin等骨架蛋白以及鈣激活的中性蛋白酶m-calpain和μ-calpmn含量的變化。 3 取大鼠大腦和脊髓組織，提取總RNA，利用RT-PCR技術研究HD和CS<,2>染毒對大鼠中樞神經(jīng)組織中NF-H、NF-M、NF-L、α-tubulin、β-tubulin和β-actin mRNA表達水平的影響。

4、 4 取大鼠大腦、脊髓和坐骨神經(jīng)組織制備勻漿，8,000 xg，4℃離心30 min。利用Calbiochem<○R>InnoZymeTM Calpain 1&2 Activity Kit檢測大鼠大腦、脊髓、坐骨神經(jīng)組織中calpains總活性的變化。 結(jié)論 1、HD、CS<,2>染毒引起大鼠中樞和周圍神經(jīng)組織中3種NF亞單位含量發(fā)生明顯變化，其中NF-M和NF-L的變化較NF-H更加顯著。 2、H

5、D誘導的大鼠神經(jīng)組織NF亞單位含量變化與其神經(jīng)行為學改變之間存在高度相關性。 3、HD誘導的神經(jīng)組織NF含量下降具有可逆性，并與HD中毒性神經(jīng)病癥狀的恢復有關。 4、HD、CS<,2>染毒對不同神經(jīng)組織中α-tubulin、β-tubulin和β-actin亞單位的影響不同。HD主要影響坐骨神經(jīng)中α.tubulin、β-tubulin和β-actin的含量，而CS<,2>對中樞和周圍神經(jīng)組織中α-tubulin、β-tu

6、bulin和β-actin的含量均產(chǎn)生明顯影響，其中β-tubulin的變化較α-tubulin和β-actin更加顯著。 5、HD、CS<,2>對細胞骨架的六種成分的影響程度不同，其中NFs含量的變化比tubulins、β-actin顯著。 6、HD染毒對神經(jīng)組織中六種細胞骨架蛋白的mRNA表達未產(chǎn)生明顯影響，而CS<,2>染毒影響了神經(jīng)組織中六種細胞骨架蛋白的mRNA表達水平，表現(xiàn)為大腦組織中NF-L、NF-H和β-

7、tubulin mRNA的轉(zhuǎn)錄水平下調(diào)，而脊髓組織中NF-H、NF-M、NF-L、β-tubulin和β-actin mRNA的轉(zhuǎn)錄水平上調(diào)。 7、HD、CS<,2>染毒影響了神經(jīng)組織中calpains表達和活性，表現(xiàn)為中樞神經(jīng)組織中calpains活性下降，坐骨神經(jīng)中calpaills活性升高。末梢軸索中calpains的激活可能與HD、CS<,2>誘導的神經(jīng)絲含量下降有關。 8、毒物引起的神經(jīng)組織中骨架蛋白改變參與了正己烷和