1、研究背景：
　　磨損顆粒被認為在骨溶解的發(fā)生和發(fā)展中起著關(guān)鍵性作用。磨損顆粒會激活巨噬細胞產(chǎn)生各種促炎癥因子（IL-1，11-6，TNF-α），從而導(dǎo)致一系列級聯(lián)反應(yīng)，最終導(dǎo)致假體無菌性松動的發(fā)生。然而最近一系列的研究發(fā)現(xiàn)，完全去除內(nèi)毒素的磨損顆粒（包括金屬顆粒，聚乙烯顆粒，骨水泥顆粒）均不能誘導(dǎo)巨噬細胞產(chǎn)生炎癥因子。由此可見，磨損顆粒刺激巨噬細胞產(chǎn)生炎癥因子的經(jīng)典無菌性松動理論還有待探討。內(nèi)毒素與人類許多疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。

2、但內(nèi)毒素在磨損顆粒刺激巨噬細胞產(chǎn)生炎癥和凋亡中的作用至今都不是很清楚，本文試圖做一解釋。
　　目的：
　　1.比較磨損顆粒內(nèi)毒素的不同清除方法和內(nèi)毒素檢測方法對磨損顆粒誘發(fā)炎癥因子的影響。
　　2.以含內(nèi)毒素的鈦顆粒模擬松動假體周圍的亞臨床感染，在體外刺激巨噬細胞，觀察其凋亡情況。
　　3.含或不含內(nèi)毒素的磨損顆粒刺激巨噬細胞產(chǎn)生炎性因子的體內(nèi)外比較，觀察鈦顆粒在體內(nèi)外的不同炎性反應(yīng)。
　　4.去除內(nèi)毒素的

3、磨損顆粒在體內(nèi)產(chǎn)生炎癥因子的機制研究。
　　方法：
　　1.使用三種方法清除內(nèi)毒素，比較其清除能力以及對巨噬細胞的生物學影響。
　　2.使用含或不含內(nèi)毒素鈦顆粒，分別刺激巨噬細胞，觀察鈦顆粒和內(nèi)毒素對巨噬細胞的細胞毒性作用和凋亡作用。
　　3.運用ELISA和RealtimePCR反應(yīng)來證實(1)含有內(nèi)毒素的磨損顆粒是否能被巨噬細胞清除內(nèi)毒素，(2)不含內(nèi)毒素的磨損顆粒是否在體內(nèi)能刺激巨噬細胞產(chǎn)生炎性因子。

4、>　　4.觀察:(1)內(nèi)毒素和磨損顆粒粘附性。(2)人體正常水平內(nèi)毒素的濃度是否足以激活假體周圍由于磨損顆粒的產(chǎn)生而聚集的巨噬細胞？(3)體內(nèi)內(nèi)毒素水平的升高是否也會影響假體周圍巨噬細胞的炎癥反應(yīng)？
　　結(jié)果：
　　1.強酸強堿反復(fù)處理，去除內(nèi)毒素的方法最好;去除鈦顆粒表面內(nèi)毒素后，幾乎不能誘導(dǎo)巨噬細胞產(chǎn)生炎性因子。
　　2.隨著去除內(nèi)毒素的鈦顆粒濃度的增加，其對巨噬細胞的毒性和凋亡作用亦增加;而內(nèi)毒素在鈦顆粒低濃度時

5、無明顯影響，在鈦顆粒高濃度時明顯增強鈦顆粒對巨噬細胞的毒性和凋亡作用;含內(nèi)毒素的高濃度鈦顆粒其致凋亡途徑可能是由升高的NO和TNF-α引起的。
　　3.體外實驗表明，無論含或不含內(nèi)毒素，經(jīng)巨噬細胞吞噬后，最終都無法誘導(dǎo)巨噬細胞產(chǎn)生炎癥因子。體內(nèi)實驗表明，含或不含內(nèi)毒素鈦顆粒誘導(dǎo)體內(nèi)巨噬細胞產(chǎn)生炎性因子時僅在早期存在差異，后期沒有差異。但不含內(nèi)毒素的鈦顆粒氣囊與空白囊相比，確實存在比較多的炎性因子。
　　4.鈦顆粒和內(nèi)毒素在體

6、外沒有很強的黏附性;生理水平的內(nèi)毒素足以刺激巨噬細胞產(chǎn)生炎性反應(yīng);在相同生理水平的內(nèi)毒素情況下，局部聚集的巨噬細胞越多，其產(chǎn)生的炎癥水平也相對越高;體內(nèi)內(nèi)毒素有很強的穿透性，可異位影響遠處聚集的巨噬細胞產(chǎn)生炎性因子。
　　結(jié)論：
　　1.在使用磨損顆粒做炎癥研究時，必須使用正確的內(nèi)毒素去除和檢測方法，不然會導(dǎo)致研究結(jié)果不可信。
　　2.亞臨床感染和磨損顆粒共同作用可能是無菌性松動假體周圍巨噬細胞凋亡的真正原因。