血竭血清指紋圖譜的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、血竭(Sanguis Draconis)為棕櫚科植物麒麟竭(Deamonorops draco BL)及同屬他種植物和龍舌蘭科植物劍葉龍血樹(Dracaena Cochinchinensis (Lour.)S.C.Chen)及同屬植物的果實或含樹脂木材的乙醇提取物,植物來源分屬4科5屬的20余種植物,作為傳統(tǒng)中藥使用已有1500多年的歷史。至1971 年開發(fā)成功了國產(chǎn)血竭,為傳統(tǒng)中藥血竭的國產(chǎn)化奠定了基礎(chǔ)。國產(chǎn)血竭與進(jìn)口血竭化學(xué)成分不同

2、,但都具有活血化瘀、消腫止痛、收斂止血的功效,尤其是近年來采用國產(chǎn)血竭治療心腦血管疾病,有較好的療效。 本論文以國產(chǎn)血竭及進(jìn)口血竭為研究對象,通過對指紋圖譜及血清指紋圖譜的研究,確定其在體外和體內(nèi)化學(xué)成分上的相關(guān)性,并與藥理學(xué)結(jié)果相關(guān)聯(lián),初步形成中藥指紋圖譜、中藥血清指紋圖譜及藥理作用三位一體的統(tǒng)一,為確定一個或若干有效成分作為原藥材及制劑質(zhì)量控制的目標(biāo)成分,克服在指紋圖譜質(zhì)量控制上藥理作用和化學(xué)成分的相關(guān)性尚存的不足,為建立

3、起一套完整的對中藥質(zhì)量全面綜合的評估系統(tǒng)提供依據(jù)。 全文由以下三部分組成: (一)緒論 概述血竭的生藥學(xué)、化學(xué)成分、藥理作用、含量測定方法以及中藥指紋圖譜、中藥血清指紋圖譜的研究現(xiàn)狀。 (二)血竭指紋圖譜的建立 中藥色譜指紋圖譜在控制某些峰已知對應(yīng)物質(zhì)(即指標(biāo)成分)的同時,還可通過對整個峰群的掌握,以全面控制所含物質(zhì)群。使用島津高效液相色譜儀、Diamonsil C18色譜柱及Easyguard

4、C18保護(hù)柱,以乙腈:1%冰醋酸 =38:62為流動相,280nm為檢測波長,流速1.2ml/min,記錄各血竭供試品溶液的HPLC圖譜,運用國家藥典委員會《中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)2004A版》軟件進(jìn)行相似度分析:國產(chǎn)血竭供試品指紋圖譜相似度結(jié)果在0.797-0.976之間,與進(jìn)口血竭(印度尼西亞產(chǎn))有顯著差異,相似度結(jié)果僅為0.268。 (三)含藥血清制備方法的研究 血清中含有的成分才是中藥的體內(nèi)直接作用物質(zhì)

5、,為去除血清中固有成分及內(nèi)源性雜質(zhì),高度富集入血成分,實驗通過在空白血中加入廣西“芒果牌”血竭,將其HPLC圖譜中特征峰較為明顯的5個成分的峰面積作為檢測指標(biāo)(其中2個為龍血素A和龍血素B),以原溶液為對照計算加樣后的提取百分率,確定制備含藥血清的最佳途徑,結(jié)果顯示先通過乙腈沉淀血漿蛋白,再使用與血樣同等量的乙酸乙酯提取三次,可使血竭中5個特征性成分的提取率達(dá)到80%以上。 (四)血清指紋圖譜的建立 在上述研究得到的實驗

6、條件基礎(chǔ)上,測定各血竭供試品的血清HPLC圖譜,原藥材中11個共有峰(除印尼血竭不含9號峰——龍血素B,其血清中亦無)中有5個均在血清中有不同程度的表達(dá),相對保留時間吻合,生成國產(chǎn)血竭血清對照指紋圖譜后與各血清指紋圖譜匹配色譜峰進(jìn)行相似度分析,“芒果牌”、“版納牌”、“柬龍牌”血竭的相似度值較為接近,分別為0.825、0.845、0.932,“龍王牌”和進(jìn)口血竭(印度尼西亞產(chǎn))分別為0.625、0.605,后兩種血竭與對照指紋圖譜差異較

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