1、　本文主要建立了并論證了激素非依賴性LNCaP前列腺癌細(xì)胞亞系模型，并對其發(fā)生機(jī)制進(jìn)行了探討。首先長期在去激素的血清環(huán)境下培養(yǎng)出能夠適應(yīng)無激素環(huán)境的LNCaP-AI細(xì)胞亞系，利用MTT、RT-PCR、熒光免疫方法對LNCaP-AI細(xì)胞系在無激素環(huán)境下的增殖能力和本身表達(dá)及分泌PSA的能力進(jìn)行驗證。然后運用RT-PCR和Westernbloting方法檢測LNCaP-AI細(xì)胞系A(chǔ)R、NKX3.1基因和Bcl-2、Bax、Akt、p-Akt

2、蛋白的表達(dá)情況，用流式細(xì)胞儀檢測激素撤退對LNCaP前列腺癌細(xì)胞周期分布的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)LNCaP前列腺癌細(xì)胞在無激素中培養(yǎng)3個月后逐漸適應(yīng)了無激素的環(huán)境，成為激素非依賴的LNCaP-AI細(xì)胞亞系。最后結(jié)論證明，激素非依賴性的LNCaP-AI前列腺癌細(xì)胞亞系，可以模擬前列腺癌由激素依賴發(fā)展為雄激素非依賴的過程，是理想的激素非依賴前列腺癌的細(xì)胞模型，激素撤退可引起LNCaP細(xì)胞G1期的積累，Bcl-2、p-Akt的升高，Bcl-2/Bax