豬源2009甲型H1N1流感病毒的分離鑒定及其致病性的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、2009年3月新甲型H1N1流感病毒在墨西哥暴發(fā),同年4月第1株2009甲型H1N1流感病毒被分離,之后有越來越多的報道表明2009甲型H1N1流感病毒可以由人向豬傳播。研究證明,2009甲型H1N1流感病毒是混合了豬源流感病毒、禽源流感病毒和人源流感病毒三者特征的重組病毒,給養(yǎng)豬業(yè)帶來巨大經(jīng)濟(jì)損失,也對人類的健康構(gòu)成威脅。因此對豬群中H1N1流感病毒進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查和監(jiān)測具有重要的公共衛(wèi)生意義。本實驗從2013年1月~2014年12月

2、對廣西省部分養(yǎng)豬場及發(fā)病豬群進(jìn)行樣品采集和病毒的分離,目的為研究該區(qū)域豬群中流行的流感病毒亞型、變異規(guī)律和發(fā)病情況,為豬流感的研究和防控提供參考。實驗成果如下:
  1.從發(fā)病豬群分離鑒定得到12株H1N1亞型豬流感病毒,其中1株為2009甲型H1N1流感病毒。本研究從2013年1月~2014年12月采集至廣西8個市(地區(qū))發(fā)病豬群的豬組織病料共1609份進(jìn)行病毒分離。經(jīng)9~11日齡SPF雞胚分離得到12株豬流感病毒株。運(yùn)用RT-

3、PCR的方法對12株病毒的HA和NA基因進(jìn)行擴(kuò)增和序列測定分析,鑒定12株病毒均為H1N1亞型,其中1株為2009甲型H1N1流感病毒。將這株豬源2009甲型H1N1流感病毒株作為本實驗研究的對象,并命名為A/swine/Guangxi/18/2013(H1N1)。
  2.遺傳進(jìn)化分析表明分離株8個基因片段與其他2009甲型H1N1流感病毒的進(jìn)化關(guān)系一致。對A/swine/Guangxi/18/2013(H1N1)全基因組的8個

4、基因片段進(jìn)行RT-PCR擴(kuò)增、克隆及序列測定,運(yùn)用MegAlign軟件進(jìn)行核苷酸和氨基酸的比較分析,再通過MEGA5.0軟件構(gòu)建遺傳進(jìn)化樹。進(jìn)化分析結(jié)果表明分離株與2009甲型H1N1流感毒株處于同一個進(jìn)化枝,與A/California/04/2009(H1N1)親緣關(guān)系很近,起源于同一祖先。其基因來源情況為:HA、NS和NP基因來源于古典型H1N1豬源譜系,NA和M基因來源于類禽型H1N1豬源譜系,PA和PB2基因來源于禽源譜系,PB

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