1、背景:
　　 運動功能障礙、吞咽困難、失語、視覺障礙等都是有幸存活下來的腦卒中患者較常見的后遺癥。近年來，為了更好的改善腦卒中患者殘余的功能障礙，許多新的康復方法已經(jīng)被應用?？祻椭委煹男Чm然已經(jīng)得到國際公認，但缺血性腦卒中存在非常復雜的病理生理機制，有多種病理環(huán)節(jié)參與，其中減輕急性期的神經(jīng)元凋亡與損傷是改善其預后及其疾病轉歸的關鍵，如何增強缺血性腦組織對損傷的耐受力是亟待解決的問題。有研究發(fā)現(xiàn)，神經(jīng)生長因子不足將嚴重限制腦卒中

2、患者3個月后的感覺、運動功能的恢復。目前研究證實，鼠神經(jīng)生長因子(NGF)可以顯著改善急性期神經(jīng)細胞的病理狀態(tài)，促進缺血組織神經(jīng)元的存活和生長發(fā)育并可以防止其受損凋亡，刺激受損神經(jīng)元分化成熟及再生，并能夠選擇性的作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)，顛覆了傳統(tǒng)觀點認為的NGF僅作用于周圍神經(jīng)的看法。我們的前期臨床研究也證實，NGF對康復治療的腦卒中的患者的日常生活活動能力(activitiies of daily living，ADL)及運動功能有較好的

3、促進效應，但具體機制尚不明確。國內(nèi)外文獻報道尚少。有研究表明，康復訓練能夠促使腦細胞分泌BDNF等多種營養(yǎng)因子，但是對于康復訓練聯(lián)合NGF對腦卒中患者的神經(jīng)功能恢復的生物學機制尚不清楚。國內(nèi)外文獻也未見具體相關報道。腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(brain derived neurophic factor，BDNF)作為神經(jīng)營養(yǎng)因子家族其中的一員，具有抵抗細胞凋亡、增加突觸的可塑性及促神經(jīng)元軸突生長，加速神經(jīng)康復的作用。腦損傷后各種功能障礙的重要

4、原因就是腦缺血后誘發(fā)的多種病理生理改變誘導的神經(jīng)細胞發(fā)生凋亡。防止細胞凋亡是缺血性腦損傷疾病轉歸的關鍵，Bax是Bcl-2家族的一個凋亡前體成員，其水平的高低與神經(jīng)元的凋亡密切相關，Bax能激活Caspase家族級聯(lián)反應進而誘導凋亡信號通路的啟動。本課題通過改良線栓法制作大鼠右側中動脈栓塞(MCAO)腦梗死模型，給予外源性NGF并采用神經(jīng)行為學評分、免疫組織化學(immunohistochemistry, IHC)及逆轉錄聚合酶鏈式反應

5、(reverse transcription polymerase chain reaction，RT-PCR)檢測方法觀察康復訓練聯(lián)合NGF對腦梗死大鼠神經(jīng)行為學及腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子BDNF、促凋亡蛋白Bax表達的影響，探討分析其在缺血后腦損傷中發(fā)揮神經(jīng)保護作用的生物學機制。
　　 目的:
　　 探討康復訓練聯(lián)合NGF對腦梗死大鼠神經(jīng)行為學及海馬組織中BDNF和Bax表達的影響，研究二者在促進大鼠神經(jīng)功能恢復方面是否存

6、在協(xié)同效應及其作用機制。
　　 方法:
　　 將大鼠隨機分為對照組、NGF組、康復訓練組及康復訓練聯(lián)合NGF治療組;采用改良線栓法制作大鼠右側中動脈栓塞(MCAO)腦梗死模型，NGF組制模成功后立即給予肌肉注射NGF20μg/（kg·d）;康復訓練組制模成功后72 h給予平衡木、轉棒、網(wǎng)屏、滾筒訓練;聯(lián)合治療組同時給予NGF和康復訓練治療。各組分別于術后7d、14d、21d采用國際上通用的評判標準Zea-longa5分制

7、進行神經(jīng)功能評分;采用免疫組化法檢測海馬組織BDNF及Bax蛋白的表達，RT-PCR法檢測BDNF mRNA、Bax mRNA的表達。
　　 結果:
　　 1.各組神經(jīng)行為學評分的比較各個時間點康復訓練組、NGF組及聯(lián)合治療組點神經(jīng)行為學評分明顯低于對照組（均P＜0.05);且聯(lián)合治療組明顯低于康復訓練組、NGF組（均P＜0.05)。
　　 2.免疫組化檢測BDNF、Bax的表達:與對照組相比，康復訓練組、NGF

8、組及聯(lián)合治療組各時間點海馬組織BDNF表達的光密度(optical density, OD)值明顯增加，Bax表達的OD值明顯降低（均P＜0.05）;與康復訓練組、NGF組相比，聯(lián)合治療組海馬組織BDNF及Bax表達差異有統(tǒng)計學意義（均P＜0.05)。
　　 3.RT-PCR檢測各組腦組織BDNFmRNA和Bax mRNA表達的比較與對照組相比，康復訓練組、NGF組及聯(lián)合治療組各時間點海馬組織BDNFmRNA累積光密度(Iteg

9、ral Optical Density，IOD)明顯增加，BaxmRNAIOD明顯降低（均P＜0.05）;與康復訓練組、NGF組相比，聯(lián)合治療組海馬組織BDNF mRNA及Bax mRNA IOD表達差異有統(tǒng)計學意義（均P＜0.05）。
　　 結論:
　　 1、康復訓練聯(lián)合NGF可通過上調(diào)BDNF、下調(diào)Bax的表達而顯著促進大鼠神經(jīng)功能恢復。
　　 2、康復訓練與NGF二者在促進神經(jīng)元存活及阻抑細胞凋亡方面存在協(xié)