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文檔簡介
1、本文以黃粉蟲誘集法從土壤中采集并篩選到了對桑天牛幼蟲具有較高毒性的球孢白僵菌Bb00菌株,并系統(tǒng)研究了其生物學特性、對桑天牛的致病性及其影響因子、白僵菌對桑天牛幼蟲的入侵和致病過程、桑天牛幼蟲對白僵菌入侵和致病的防御反應、桑天牛幼蟲染病后的病理學變化,及主要化學殺蟲劑與該菌株的相容性等內容。結果如下: 利用黃粉蟲誘集法從不同土壤中分離到球孢白僵菌9株,分離率為45%,并對桑天牛幼蟲進行了生物測定。結果表明不同菌株的致病力存在差異
2、,其中以Bb00菌株的致病力最強,校正死亡率及感染率分別為100%和86.3%,致死中時LT<,50>為4.13 d,致死中濃度LC<,50>為3.05×10<'6> m L<'-1>。 該菌株營養(yǎng)生長的最適培養(yǎng)基為PPDA,最適溫度和濕度分別為25℃和100%。紫外線照射對其營養(yǎng)生長無顯著影響。該菌產孢的最適培養(yǎng)基為察氏培養(yǎng)基,2%葡萄糖+1%蛋白胨的混合營養(yǎng)液最利于孢子萌發(fā)。孢子萌發(fā)的最適溫度為25℃,最適濕度為100%。紫
3、外線對孢子的萌發(fā)有較強的抑制作用,但光照對其影響不顯著。 白僵菌Bb00菌株不能侵染桑天牛卵,對成蟲有一定的侵染力,但侵染率不高,僅為24.0%。Bb00菌株對桑天牛幼蟲產生致病作用的最適溫度為25℃,最適濕度為100%。察氏培養(yǎng)基上傳代,會導致菌株致病力的降低,而通過桑天牛幼蟲傳代培養(yǎng)可以提高菌株的致病力。 桑天牛幼蟲接菌后20~24h,孢子即可穿透體壁,之后進入血腔并大量繁殖,逐漸侵染體腔內的組織與器官,直至寄主死亡
4、。寄主在遭受真菌入侵時受到一定的損傷,其免疫互作使酚氧化酶活性先迅速上升,但隨后因菌株的適應性增強而使酚氧化酶活性開始下降。白僵菌經過數次在普通察氏培養(yǎng)基上傳代比在桑天牛幼蟲上傳代可引起染病桑天牛幼蟲血淋巴內更高的酚氧化酶活性,各菌株引起的天牛幼蟲酚氧化酶活性出現高峰的時間與其LT<,50>具有一定的相關性,反應了不同的侵染速度;同時各菌株酚氧化酶活性高峰值也與LC<,50>高度相關。桑天牛幼蟲的血細胞對侵入體內的白僵菌的菌絲段具有黏附
5、、吞噬、囊包、聚集及形成結節(jié)等反應,高峰期發(fā)生在接種后2~2.50d,參與防御反應的血細胞主要是粒細胞和漿細胞。但由于菌絲段在血液中大量增殖,最終血細胞對白僵菌只起暫時的阻礙和抑制作用,不能從根本上消除白僵菌的發(fā)展。 桑天牛幼蟲感染白僵菌后,其取食量、平均體重增加量和食物利用率均比健康蟲體降低。呼吸強度和蛋白質含量的變化表現為先上升而后迅速下降。但氨基酸總量的變化則出現先下降而后上升的趨勢,不同種類的氨基酸含量變化情況不一致。
6、 桑天牛幼蟲被白僵菌侵染后,為抵御外界干擾,其機體內SOD、POD和CAT活性在接種后初期迅速提高,但在接種后期均出現不同程度下降。桑天牛幼蟲感染白僵菌后,血淋巴主要解毒酶羧酸酯酶和谷胱甘肽-S-轉移酶活性變化均表現為先上升而后又逐漸下降。而白僵菌對乙酰膽堿酯酶活力的影響則表現為先抑制后激活再抑制再激活再抑制。白僵菌侵入昆蟲血腔后,隨著菌絲在體腔內大量繁殖,受侵的各器官和組織均發(fā)生明顯的病變,如皮細胞層和表皮分離、脂肪體松散、消化
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