玉米主要霉菌毒素體外評(píng)定與吸附劑研發(fā).pdf_第1頁(yè)
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1、霉菌毒素是霉菌在基質(zhì)(飼料、飼料原料等)上生長(zhǎng)的過(guò)程中所產(chǎn)生的有毒的次級(jí)代謝產(chǎn)物,包括霉菌使基質(zhì)(飼料)的成分轉(zhuǎn)變而形成的有毒物質(zhì)。霉菌毒素能夠干擾許多靶器官和系統(tǒng),尤其是肝、腎、神經(jīng)系統(tǒng)、內(nèi)分泌系統(tǒng)和免疫系統(tǒng),引發(fā)人類(lèi)和動(dòng)物疾病。研究表明當(dāng)植物受到霉菌毒素的侵害時(shí),會(huì)進(jìn)行自我保護(hù),將非極性的毒素與糖、氨基酸或硫酸鹽等結(jié)合,轉(zhuǎn)化為極性更強(qiáng)的代謝產(chǎn)物,儲(chǔ)存在液泡中或結(jié)合在器官、組織、細(xì)胞器等的生物大分子上,從而產(chǎn)生霉菌毒素的結(jié)合態(tài)。常規(guī)的

2、霉菌毒素檢測(cè)方法只能檢測(cè)到游離態(tài)的霉菌毒素,而檢測(cè)不到結(jié)合態(tài)的霉菌毒素,因而這部分結(jié)合態(tài)的毒素也被稱(chēng)為隱蔽性毒素。然而研究表明結(jié)合態(tài)的霉菌毒素經(jīng)動(dòng)物消化后會(huì)被部分或全部釋放出來(lái),危害畜禽的健康。因此,建立一種快速真實(shí)地評(píng)定飼料及飼料原料中霉菌毒素(游離態(tài)和結(jié)合態(tài))的含量顯得尤為重要。本研究通過(guò)3個(gè)試驗(yàn)分別研究了霉菌毒素的體內(nèi)外釋放測(cè)定,在此基礎(chǔ)上分析了現(xiàn)有的霉菌毒素吸附劑對(duì)黃曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮和嘔吐毒素的吸附效率,并開(kāi)展了新型吸

3、附劑的開(kāi)發(fā)研究。
  為了能夠真實(shí)地評(píng)定結(jié)合態(tài)和游離態(tài)的霉菌毒素,本試驗(yàn)建立了體外消化評(píng)定法。通過(guò)體外消化法模擬動(dòng)物體內(nèi)的消化過(guò)程對(duì)發(fā)霉玉米進(jìn)行消化。玉米樣品在60目的篩下物樣品,先后用胃蛋白酶和胰蛋白酶進(jìn)行體外消化,然后再用ELISA的方法對(duì)消化前后的霉菌毒素進(jìn)行檢測(cè)。試驗(yàn)結(jié)果表明玉米中的霉菌毒素AFB1(P<0.001)、DON(P<0.01)、ZEN(P<0.05)經(jīng)過(guò)體外消化后毒素含量會(huì)明顯升高。采用了高效液相色譜法對(duì)EL

4、ISA檢測(cè)的結(jié)果進(jìn)行了驗(yàn)證,試驗(yàn)結(jié)果表明表明玉米中的霉菌毒素AFB1(P<0.05)、DON(P<0.001)、ZEN(P<0.001)經(jīng)過(guò)體外消化后毒素含量會(huì)明顯升高,高效液相色譜法進(jìn)一步驗(yàn)證了玉米中的霉菌毒素AFB1、DON、ZEN經(jīng)過(guò)體外消化后毒素含量會(huì)明顯升高。為了驗(yàn)證體外消化試驗(yàn)結(jié)果的真實(shí)性,還進(jìn)行了肉雞體內(nèi)消化試驗(yàn)來(lái)驗(yàn)證體外消化試驗(yàn)的結(jié)果。試驗(yàn)挑選10只體重基本一致的健康A(chǔ)A肉仔雞,單籠飼養(yǎng),禁食12h,自由飲水,自由采食含

5、1%三氧化二鉻的發(fā)霉玉米4h,采集十二指腸、空腸、回腸內(nèi)容物。分別檢測(cè)飼料、十二指腸內(nèi)容物、空腸內(nèi)容物、回腸內(nèi)容物中的三氧化二鉻(濕法消化法)及霉菌毒素AFB1、DON、ZEN含量(ELISA)。試驗(yàn)結(jié)果表明發(fā)霉玉米經(jīng)肉雞體內(nèi)消化后AFB1(P<0.05)、DON(P<0.05)、ZEN(P<0.01)的含量顯著升高。
  上述結(jié)果表明:霉菌毒素在玉米體內(nèi)存在結(jié)合態(tài)和游離態(tài)兩種形式,結(jié)合態(tài)霉菌毒素經(jīng)消化后會(huì)被充分的釋放出來(lái),轉(zhuǎn)變?yōu)?/p>

6、游離態(tài)的霉菌毒素。
  為了真實(shí)地評(píng)價(jià)霉菌毒素吸附劑的吸附效果,本試驗(yàn)還通過(guò)體外消化評(píng)定法對(duì)市場(chǎng)上收集的10種霉菌毒素吸附劑的吸附效果進(jìn)行了評(píng)定,試驗(yàn)結(jié)果表明3#、9#吸附劑對(duì)三種毒素均有較好的吸附效果,其它吸附劑對(duì)各個(gè)毒素的吸附效果各有側(cè)重,3#、9#是酵母細(xì)胞產(chǎn)品,這說(shuō)明酵母細(xì)胞產(chǎn)品對(duì)霉菌毒素的吸附效果較好。
  為了有效地去除飼料中的霉菌毒素,本課題研發(fā)了一種新型經(jīng)濟(jì)有效的霉菌毒素吸附劑,并用體外消化評(píng)定法對(duì)該吸附劑的

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