1、前言抑郁癥是一種常見的精神疾病，具有較高的復(fù)發(fā)率和終生患病率。越來(lái)越多的研究表明，神經(jīng)元可塑性和細(xì)胞順應(yīng)性的損害參與到抑郁癥的發(fā)病的病理生理過程中來(lái)。海馬神經(jīng)元損傷是神經(jīng)系統(tǒng)可塑性調(diào)節(jié)中的一個(gè)重要環(huán)節(jié)，在研究抑郁癥病因和發(fā)病機(jī)制中占有重要地位。慢性應(yīng)激可引起大腦器質(zhì)性損害，尤其是海馬結(jié)構(gòu)和功能的損害，最終誘發(fā)抑郁癥。CREB是一種細(xì)胞核內(nèi)的轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，參與了多種與神經(jīng)元可塑性調(diào)節(jié)有關(guān)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的調(diào)控，在神經(jīng)元可塑性和細(xì)胞順應(yīng)性的調(diào)

2、節(jié)中起著重要作用。本研究通過觀察慢性應(yīng)激抑郁模型大鼠腦海馬CREB的表達(dá)情況，以探討慢性應(yīng)激所致抑郁癥的腦損傷和神經(jīng)保護(hù)機(jī)制。 實(shí)驗(yàn)材料1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物采用雄性Wistar大鼠48只，體重180～220克，由中國(guó)醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。 2.主要試劑兔抗大鼠CREB抗體(CellSignalingTechnology，＃9192)；生物素標(biāo)記的山羊抗兔IgG，SABC免疫組化染色試劑盒，DAB顯色劑(以上購(gòu)自北京中杉公司)

3、；硝酸纖維素膜購(gòu)于上海華美生物制劑公司。 3.實(shí)驗(yàn)儀器YSD-4G型藥理生理實(shí)驗(yàn)多用儀；MetaMorph/CoolSnapfx/Ax70計(jì)算機(jī)圖像分析系統(tǒng)。 實(shí)驗(yàn)方法1.動(dòng)物分組依Open—field法評(píng)分將大鼠隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組1，實(shí)驗(yàn)組2，對(duì)照組1，對(duì)照組2各12只。 2.抑郁模型制作第1～21天實(shí)驗(yàn)組大鼠每天隨機(jī)接受不同的刺激。第22天所有大鼠再次采用Open—field法評(píng)定行為。 3.CREB的檢

4、測(cè)實(shí)驗(yàn)組1和對(duì)照組1的大鼠經(jīng)多聚甲醛灌流固定后剝?nèi)∪X，制作含海馬的石蠟切片，采用特異性抗體的免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)海馬CA3區(qū)和齒狀回中CREB的含量。實(shí)驗(yàn)組2和對(duì)照組2的大鼠直接斷頭處死后剝離海馬，采用Westernblot法測(cè)定海馬CREB的含量。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果1.體重和開場(chǎng)行為評(píng)定：實(shí)驗(yàn)組大鼠體重顯著低于對(duì)照組(P＜0.01)；水平穿越格數(shù)減少(P＜0.01)；直立次數(shù)減少(P＜0.01)；修飾次數(shù)減少(P＜0.01)。

5、 2.CREB的表達(dá)：免疫組織化學(xué)染色中實(shí)驗(yàn)組大鼠海馬CA3區(qū)和DG區(qū)CREB的表達(dá)明顯低于對(duì)照組(P＜0.05)。WesternBlot實(shí)驗(yàn)中實(shí)驗(yàn)組大鼠CREB蛋白含量明顯低于對(duì)照組(P＜0.05)。 結(jié)論1.慢性應(yīng)激抑郁模型的大鼠體重降低，探究行為和修飾行為減少。2.慢性應(yīng)激抑郁模型大鼠海馬CA3區(qū)和齒狀回神經(jīng)元CREB表達(dá)的水平顯著低于對(duì)照組；海馬CREB蛋白的含量顯著低于對(duì)照組。 3.CREB可能參與了慢性應(yīng)激