瑞昌山藥炭疽病菌初步研究及其病毒和線蟲病害病原鑒定.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、山藥(Dioscoreaopposita Thunb),又名薯蕷,為一年生或多年生薯蕷科薯蕷屬藤本植物,兼具食藥同源作用,是一種重要的蔬菜作物,深受廣大人們的喜愛。瑞昌山藥是江西省瑞昌市的特色經(jīng)濟作物,然而近年來山藥病害的發(fā)生日益嚴重,給該地山藥產(chǎn)業(yè)的發(fā)展帶來了嚴重的障礙。
  本文采用傳統(tǒng)形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)手段對瑞昌山藥炭疽病的病原菌種類歸屬、病菌生物學(xué)特性、殺菌劑室內(nèi)毒力測定等進行了系列研究,對瑞昌山藥病毒病和根腐線蟲病的病原

2、進行了鑒定,取得如下研究結(jié)果:
  從采集于瑞昌市范鎮(zhèn)、洪嶺鄉(xiāng)、高豐鎮(zhèn)3個鄉(xiāng)鎮(zhèn)的山藥炭疽病樣品中分離獲得9個培養(yǎng)特性和形態(tài)特征一致的真菌菌株,其性狀與文獻報道的膠孢炭疽菌性狀相符;選擇代表性菌株FZ-1進行人工致病性測定,結(jié)果該菌株能使健康山藥發(fā)病并導(dǎo)致與田間一致的發(fā)病癥狀;對菌株FZ-1進行ITS序列測定,所獲序列與GenBank中膠孢炭疽菌的對應(yīng)序列具有100%的同源性。根據(jù)上述研究結(jié)果,將瑞昌山藥炭疽病的病原鑒定為半知菌類中

3、的膠孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)。生物學(xué)特性研究結(jié)果表明:C.gloeosporioides最適生長培養(yǎng)基為PDA,25℃為最適生長溫度,最適生長pH7.0,最適生長光照為12h光暗交替,最適生長碳源為麥芽糖,最適生長氮源為酵母膏。
  采用菌絲生長速率法測定了29種殺菌劑對膠孢炭疽菌的室內(nèi)毒力,結(jié)果表明不同殺菌劑的毒力大小不同。125g/L氟環(huán)唑的抑菌作用最強,其EC50為0.1264

4、μg/mL,52.5%噁酮·霜脲氰的抑菌作用最弱,其EC50值可忽略不計。其他27種殺菌劑:300g/L苯甲·丙環(huán)唑、41%甲硫·戊唑醇、10%苯醚·甲環(huán)唑、40%丁香·戊唑醇、23%醚菌·氟環(huán)唑、325g/L苯甲·嘧菌酯、18.7%烯?!み吝蝓ァ?5%肟菌·戊唑醇、40%已唑醇、250g/L吡唑嘧菌酯、50%福美林、60%唑醚·代森聯(lián)、42.4%唑醚·氟酰胺、500g/L異菌脲、300g/L醚菌·啶酰菌、60%霜脲·嘧菌酯、24%腈苯

5、唑、20%噻唑鋅、22.5%啶氧菌酯、70%丙森鋅、46%氫氧化銅、240g/L噻呋酰胺、42.8%氟菌.肟菌酯、250g/L嘧菌酯、50%烯酰嗎啉、50%啶酰菌胺、68.75%氟菌·霜霉威的抑菌作用逐漸減弱。
  從范鎮(zhèn)、洪嶺鄉(xiāng)和高豐鎮(zhèn)3個鄉(xiāng)鎮(zhèn)各采集1個山藥病毒病樣品,提取樣品總RNA,按照文獻報道的馬鈴薯Y病毒屬基因組序列設(shè)計引物,對樣品RNA進行反轉(zhuǎn)錄PCR擴增,再對擴增產(chǎn)物進行克隆和序列測定,結(jié)果獲得序列,將該序列遞交到G

6、enBank中比對,與日本山藥花葉病毒?。↗apaneseyammosaicvirus,JYMP)的對應(yīng)序列具有85%的同源性,而與其他病毒的同源性較低。根據(jù)序列鑒定結(jié)果,我們認為瑞昌山藥病毒病的病原為日本山藥花葉病毒。
  從上述三地采集了11個山藥根腐線蟲樣品,經(jīng)分離獲得11個根腐線蟲分離物,對這11個分離物進行了形態(tài)觀察、大小測量,同時選擇代表性分離物進行了16S rDNA核苷酸序列擴增和序列測定,全部結(jié)果符合文獻對咖啡短體

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