1、二化螟是我國水稻上重要的鉆蛀性害蟲之一，可造成枯心和白穗等為害癥狀，進而導致嚴重的產(chǎn)量與經(jīng)濟損失。二化螟體內(nèi)具有豐富的酯酶同工酶，并與其殺蟲劑抗性密切相關(guān)。發(fā)掘二化螟酯酶基因資源，可以為害蟲田間抗性監(jiān)測與治理、新型高效“環(huán)境友好型”藥劑創(chuàng)制與開發(fā)以及農(nóng)藥殘留環(huán)境監(jiān)測和控制提供基礎(chǔ)。
　　本研究主要內(nèi)容包括：⑴二化螟酯酶基因CsCaE026的克隆和序列分析?？寺～@得二化螟酯酶基因CsCaE026的全長cDNA序列，其開放閱讀框為1，

2、671bp，編碼557個氨基酸，預測分子量63.66kD，等電點為5.86。預測編碼蛋白N-端前16個氨基酸為信號肽序列，且含有α/β-酯酶家族特征基序Gly-x-Ser-x-Gly和催化三聚體（Ser207、Glu339和His453）等保守結(jié)構(gòu)域以及二硫鍵結(jié)合位點（Cys82和Cys103）等。CsCaE026基因?qū)佴?酯酶亞家族。⑵二化螟酯酶基因CsCaE026的原核表達分析。構(gòu)建獲得CsCaE026基因重組表達載體，并在大腸桿菌

3、Rosetta菌株中誘導表達。重組表達產(chǎn)物分子量為70kD，且形成包涵體，未能檢測到酯酶活性。提取、純化重組表達蛋白，并制備獲得多克隆抗體。Western雜交結(jié)果證實，二化螟CsCaE026基因在大腸桿菌中成功表達。⑶二化螟酯酶基因CsCaE026的時空表達特征分析。分別采用實時熒光定量PCR技術(shù)和蛋白Western雜交技術(shù)，分析二化螟CsCaE026基因在轉(zhuǎn)錄與翻譯水平的時空表達分布。明確CsCaE026基因在二化螟幼蟲的中腸中高水平