血液系統(tǒng)腫瘤中WT1基因突變及啟動(dòng)子區(qū)域DNA甲基化的研究.pdf_第1頁(yè)
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1、目的:①對(duì)急性白血病患者中WT1基因第7、8、9、10外顯子區(qū)域點(diǎn)突變的發(fā)生情況進(jìn)行檢測(cè);②應(yīng)用基于聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)技術(shù)的實(shí)驗(yàn)方法研究部分血液系統(tǒng)腫瘤細(xì)胞系中WT1基因啟動(dòng)子區(qū)域CpG島的DNA甲基化水平,及其與WT1基因表達(dá)的相互關(guān)系。初步探討血液系統(tǒng)腫瘤中WT1基因功能異常的機(jī)制。 方法:①應(yīng)用PCR-單鏈構(gòu)象多態(tài)性(PCR-SSCP)技術(shù)檢測(cè)了68例初診的急性白血病患者(其中AML52例,ALL16例)及100例健康

2、對(duì)照者中WT1基因第7、8、9、10外顯子區(qū)域點(diǎn)突變的發(fā)生情況,并對(duì)其中發(fā)現(xiàn)異常的標(biāo)本進(jìn)行PCR產(chǎn)物直接測(cè)序加以驗(yàn)證;②采用RT-PCR技術(shù)及甲基化特異性PCR(MSP)技術(shù)檢測(cè)8226、HL-60、Jurkat、K562、KG-1、NB4、SHI-1、Raji、U266及U937等血液系統(tǒng)腫瘤細(xì)胞系中WT1基因mRNA表達(dá)水平及其啟動(dòng)子區(qū)域的DNA甲基化狀態(tài);③以5-雜氮脫氧胞嘧啶(5-aza-CdR)對(duì)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)存在基因啟動(dòng)子區(qū)域D

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