1、狂犬病(Rabies)是由狂犬病病毒(Rabies virus，RV)感染引起的一種致死性人畜共患傳染病。該病呈全球性分布，亞洲尤其是我國(guó)流行較為嚴(yán)重，對(duì)人類生命安全構(gòu)成嚴(yán)重威脅。目前注射疫苗仍是控制狂犬病的最可靠的手段之一，但現(xiàn)今使用的常規(guī)疫苗因存在著難于避免的安全隱患等問題，故研究和開發(fā)免疫效果好、成本低廉的新型疫苗已成為研究熱點(diǎn)。 本研究通過RT-PCR方法分別獲得了CVS株糖蛋白(glycoprotein，GP)基因和核

2、蛋白(Nucleoprotein，NP)基因的編碼區(qū)序列，測(cè)序表明GP基因序列長(zhǎng)1 575bp，編碼524個(gè)氨基酸殘基；NP基因序列長(zhǎng)l 353bp，編碼450個(gè)氨基酸殘基。與國(guó)內(nèi)外典型代表毒株CVS-11、PV-11、SRV 9、SAD-B19、HEP-Flury、ERA、3aG等進(jìn)行序列比較，GP、NP核苷酸同源性分別為89.0％～98.8％、92.6％～99.6％，氨基酸同源性分別為87.2％～97.0％、97.6％～99.3％。

3、 將NP基因克隆到原核表達(dá)載體pET28a(+1中，構(gòu)建了重組質(zhì)粒pET-N，將其轉(zhuǎn)化表達(dá)菌BL21(DE3)，于37℃ 1.0mmol/L IPTG條件下誘導(dǎo)表達(dá)。大腸桿菌菌體裂解產(chǎn)物經(jīng)SDS-PAGE電泳分析，在分子量約為54 kDa處出現(xiàn)一條新蛋白帶，和預(yù)期的目的蛋白的分子量相符。質(zhì)譜鑒定的結(jié)果表明成功表達(dá)了狂犬病毒N蛋白，用該蛋白免疫家兔，獲得兔源抗NP抗體，為RV診斷方法的建立奠定了基礎(chǔ)。 將GP基因克隆到家蠶