1、第一部分高齡孕婦中孕期血清學(xué)產(chǎn)前篩查價值探討。
　　 1、研究背景。
　　 唐氏綜合征(Down syndrome,DS)在活產(chǎn)新生兒中的發(fā)生率為1／600-1／800,是最常見的一種染色體病。以智力低下、發(fā)育遲緩和特殊的多發(fā)小畸形為主要表現(xiàn),由于缺乏有效地治療措施,這種患兒出生后將會給家庭和社會帶來沉重的經(jīng)濟和精神負擔(dān),通過產(chǎn)前診斷和選擇性人工流產(chǎn)來減少患兒的出生是目前國內(nèi)外較好的預(yù)防措施。細胞遺傳學(xué)產(chǎn)前診斷是確診胎兒

2、患有唐氏綜合征或其它染色體疾病的方法,但因為需要介入性手術(shù)取材和檢測成本高昂,僅適用于高風(fēng)險孕婦。血清學(xué)產(chǎn)前篩查具有無創(chuàng)、快捷、服務(wù)成本相對低廉的優(yōu)點,可以從接受篩查的人群中發(fā)現(xiàn)唐氏綜合征高風(fēng)險的孕婦,已被廣大孕婦所接受。當(dāng)篩查結(jié)果出現(xiàn)高風(fēng)險陽性時,即建議進行羊膜腔穿刺,采集羊水進行胎兒細胞的染色體核型分析以明確診斷。產(chǎn)前篩查常用的血清標(biāo)記物有妊娠相關(guān)血漿蛋白(PAPP-A)、甲胎蛋白(AFP)、人絨毛膜促性腺激素β亞基(β-hCG)、

3、游離雌三醇(uE3)、抑制素A(Inhibin-A)等,多項血清標(biāo)志物聯(lián)合,結(jié)合孕婦的年齡、體重等參數(shù)計算胎兒患唐氏綜合征風(fēng)險的產(chǎn)前篩查方法有很多?；谖覈鴩楹秃Y查方案的社會成本效益,目前國內(nèi)主要采用中孕期二聯(lián)篩查(AFP+freeβ-hCG)或三聯(lián)篩查(AFP+freeβ-hCG+uE3),我們產(chǎn)前診斷中心采用的是中孕期二聯(lián)篩查(AFP+freeβ-hCG)方案。隨著社會經(jīng)濟發(fā)展進步,高齡孕婦正逐漸成為龐大的一個受人關(guān)注的群體。由于

4、唐氏綜合征的發(fā)病率與年齡明顯相關(guān),因此國內(nèi)外很多協(xié)會和組織都在產(chǎn)前診斷的適應(yīng)癥中規(guī)定有年齡大于35歲的高齡孕婦,即只要懷孕婦女屬于高齡范疇,都被建議直接進行羊膜腔穿刺和染色體核型分析。近年國際上有學(xué)者提出應(yīng)改變將高齡孕婦作為羊膜腔穿刺常規(guī)的觀念。
　　 我們對中孕期二聯(lián)篩查方案篩查效果以及對于高齡孕婦中孕期產(chǎn)前篩查的價值進行研究,以期探索和完善符合我國國情的有效的產(chǎn)前篩查策略,提高唐氏綜合征及其它染色體異?；純旱臋z出率。

5、　　 2、研究目的：
　　 2.1、回顧性分析唐氏綜合征二聯(lián)產(chǎn)前篩查工作效果；
　　 2.2、對高齡孕婦中孕期血清學(xué)產(chǎn)前篩查的價值進行研究。
　　 3、研究方法：
　　 方法:用時間分辨熒光免疫分析技術(shù)測定對孕15+0-20+6周的孕婦進行血清學(xué)篩查,篩查標(biāo)記物為甲胎蛋白(AFP)、游離絨毛膜促性腺激素β亞基(freeβ-hCG),應(yīng)用Multi-cal軟件計算唐氏綜合征風(fēng)險,風(fēng)險切割值(cut off

6、)為1／270,高風(fēng)險者建議其進行侵入即羊膜腔穿刺行羊水細胞染色體檢查以確診。隨訪孕婦的妊娠結(jié)局,計算血清學(xué)二聯(lián)篩查的檢出率,假陽性率,陽性預(yù)測值。
　　 4、結(jié)果：
　　 妊娠中期血清學(xué)二聯(lián)篩查對胎兒唐氏綜合征的檢出率為85.21％(98／115),假陽性率為3.41％(3218／94307),陽性預(yù)測值為2.96％(98／3316)。高齡組檢出唐氏綜合征3例,發(fā)病率為(0.16％,3／1886)是低齡組(0.12％,

7、112／92519)的1.33倍,兩組比較,差異顯著(p<0.05)。高齡組的檢出率為100％(3／3),假陽性率為8.13％(153／1883),陽性預(yù)測值為1.92％(3／156)；低齡組中共有112例唐氏綜合征,17例為假陰性,檢出率為84.8％(95／112),假陽性率為3.32％(3065／92407),陽性預(yù)測值為3.01％(95／3160),高齡組與低齡組兩者之間假陽性率差別明顯,p<0.05。
　　 5、結(jié)論：<

8、br>　　 二聯(lián)血清學(xué)篩查檢出率偏低,且篩查不等同于確診,假陰性病例的出現(xiàn)不可完全避免,對所有采用胎兒唐氏綜合征的妊娠中期血清學(xué)二聯(lián)產(chǎn)前篩查孕婦的篩查后遺傳咨詢和確診不容忽視。對于高齡孕婦,血清學(xué)篩查仍是有效篩查手段,故對高齡產(chǎn)婦應(yīng)采取個體化胎兒唐氏綜合征篩查和診斷策略,可降低侵入性產(chǎn)前診斷比例和風(fēng)險。
　　 6、創(chuàng)新點：
　　 我們在長期原始數(shù)據(jù)積累和大樣本統(tǒng)計分析的基礎(chǔ)上,明確提出高齡孕婦產(chǎn)前診斷策略-血清學(xué)篩查仍

9、是有效篩查手段。
　　 第二部分解整合素金屬蛋白酶12在中孕期產(chǎn)前診斷唐氏綜合征中的應(yīng)用。
　　 1、研究背景。
　　 近幾年產(chǎn)前篩查在產(chǎn)科領(lǐng)域發(fā)展迅速。產(chǎn)前篩查要求經(jīng)濟、簡便、無創(chuàng)以及盡早應(yīng)用。產(chǎn)前篩查常用的血清標(biāo)記物有妊娠相關(guān)血漿蛋白(PAPP-A)、甲胎蛋白(AFP)、人絨毛膜促性腺激素β亞基(β-hCG)、游離雌三醇(uE3)、抑制素A(Inhibin-A)等。解整合素金屬蛋白酶12(ADAM12)是新近

10、發(fā)現(xiàn)的一個血清標(biāo)志物,是一種與組織生長發(fā)育相關(guān)的蛋白,具有良好的妊娠特異性,國內(nèi)外研究報道ADAM12為高效的早孕期篩查唐氏綜合征血清標(biāo)志物,但將ADAM12應(yīng)用于中孕期產(chǎn)前篩查的相關(guān)研究較少。我國產(chǎn)前篩查工作起步較晚,目前在我國開展的產(chǎn)前篩查模式是中孕期血清學(xué)二聯(lián)或三聯(lián)篩查,結(jié)合年齡、體重等來評估孕婦孕有唐氏患兒的風(fēng)險大小,而早孕篩查模式尚未被廣泛接受及采用,因此,探討ADAM12在孕中期產(chǎn)前篩查胎兒唐氏綜合征中的應(yīng)用價值更為符合中國

11、國情,為進一步提高產(chǎn)前篩查的檢出率提供優(yōu)化方案。
　　 2、研究目的：
　　 2.1、研究中孕期ADAM12在孕有唐氏綜合征胎兒的孕婦血清中的變化規(guī)律。
　　 2.2、探討ADAM12在孕中期產(chǎn)前篩查胎兒唐氏綜合征中的應(yīng)用價值。
　　 3、方法：
　　 經(jīng)染色體核型分析證實為唐氏綜合征胎兒的孕婦靜脈血血清樣本共46例為研究組(24例為假陰性),隨機選擇同期經(jīng)隨訪證實為正常新生兒孕婦靜脈血血清樣本1

12、84份為對照組(35例為假陽性),用時間分辨熒光免疫分析技術(shù)測定兩組孕婦血清ADAM12濃度,比較ADAM12的MoM值在上述兩組妊娠婦女外周血中的水平的變化,同時對ADAM12與其他血清標(biāo)志物之間的相關(guān)性進行了研究。
　　 4、結(jié)果：
　　 從孕15+0周到19+6周,正常中孕期妊娠婦女血清ADAM12水平逐漸升高,其平均MoM值為1.0,唐氏綜合征胎兒孕婦血清ADAM12的平均MoM值為1.26,兩者之間差異有統(tǒng)計學(xué)

13、意義。如果將ADAM12加入篩查方案,則檢出率從48％上升到85％,同時可降低假陽性率和假陰性率。
　　 5、結(jié)論：
　　 ADAM12是中孕期唐氏綜合征產(chǎn)前篩查的一個有效的血清學(xué)指標(biāo)。
　　 6、創(chuàng)新點：
　　 將ADAM12應(yīng)用于中孕期唐氏綜合征產(chǎn)前診斷,建立中國人群ADAM12的參考值范圍。對于ADAM12在提高檢出率,降低假陽性率方面進行了研究,尤其是在假陰性病例中的研究國內(nèi)鮮有報道。該部分研究結(jié)

14、果已以論文形式正式發(fā)表于SCI收錄期刊。
　　 第三部分解整合素金屬蛋白酶12在早孕期和中孕期產(chǎn)前篩查唐氏綜合征中與其他血清標(biāo)志物相關(guān)性的研究。
　　 1、研究背景：
　　 通過產(chǎn)前篩查發(fā)現(xiàn)唐氏綜合征高風(fēng)險孕婦,結(jié)合產(chǎn)前診斷,對確診為唐氏綜合征妊娠孕婦盡可能早的終止妊娠,最大程度地降低妊娠唐氏綜合征胎兒家庭的精神負擔(dān),因此越早進行產(chǎn)前篩查越好。唐氏綜合征早孕期篩查是可行的、有效的,歐美等西方發(fā)達國家已開始普及。基

15、于我國國情和篩查方案的社會成本效益,目前國內(nèi)主要采用中孕期二聯(lián)篩查(AFP+freeβ-hCG)或三聯(lián)篩查(AFP+freeβ-hCG+uE3),篩查效率偏低。隨著我國經(jīng)濟技術(shù)水平的提高,對早孕期篩查的需求將越來越迫切。早孕期產(chǎn)前篩查在我國剛剛起步,因為可以更早的檢出唐氏綜合征胎兒無疑是今后唐氏綜合征產(chǎn)前篩查工作的發(fā)展趨勢。
　　 目前用于早孕和中孕期產(chǎn)前篩查的血清學(xué)標(biāo)志物有妊娠相關(guān)血漿蛋白(PAPP-A)、甲胎蛋白(AFP)、

16、人絨毛膜促性腺激素β亞基(β-hCG)、游離雌三醇(uE3)、抑制素A(Inhibin-A)等,篩查方案有早孕期篩查(first trimester screening)和中孕期篩查(second trimeslcer screening),篩查模式多樣:二聯(lián)(AFP+freeβ—hCG)篩查、三聯(lián)(AFP+freeβ-hCG+uE3)篩查和四聯(lián)(AFP+freeβ-hcG+uE3+inh A)篩查,獨立的序貫篩查(independen

17、t sequential Screening)、酌情的序貫篩查(contingent Sequential Screening)以及結(jié)合早、中孕期篩查的聯(lián)合篩查(integratedscreening)等,篩查方案的發(fā)展趨勢是個體化篩查及酎情篩查。為了提高產(chǎn)前篩查的效率,提高檢出率,降低陽性率,盡可能避免假陰性病例的出現(xiàn),人們在不斷尋找新的更為有效的血清學(xué)篩查指標(biāo),不斷優(yōu)化產(chǎn)前篩查方案。
　　 解整合素金屬蛋白酶12(ADAM1

18、2)是新近發(fā)現(xiàn)的一個高效的產(chǎn)前篩查血清標(biāo)志物,有望提高唐氏綜合征的產(chǎn)前篩查效率。對ADAM12在早孕期和中孕期產(chǎn)前篩查唐氏綜合征中與其他血清標(biāo)志物相關(guān)性的研究,探討ADAM12在產(chǎn)前篩查中的作用,以期優(yōu)化現(xiàn)行產(chǎn)前篩查方案。
　　 2、研究目的：
　　 探索中國早孕期和中孕期正常單胎孕婦血清中ADAM12和freeβ-hCG、PAPP-A以及AFP水平的變化規(guī)律及相關(guān)性,為優(yōu)化中國孕婦唐氏綜合征血清學(xué)產(chǎn)前篩查方案提供理論依

19、據(jù)。
　　 3、方法：
　　 早孕期(孕9+0-13+6周)單胎孕婦339例,中孕期(15+0-20+6)單胎孕婦1104例,用時間分辨熒光免疫分析技術(shù)測定孕婦血清ADAM12和freeβ-hCG、PAPP-A以及AFP的水平,統(tǒng)計分析ADAM12與體重、孕周的關(guān)系及與其它血清標(biāo)志物之間的相關(guān)性。
　　 4、結(jié)果：
　　 早孕期339例單胎妊娠中未檢出唐氏綜合征胎兒,中孕期胎兒染色體核型證實為唐氏綜合征的

20、妊娠婦女22例。ADAM12在正常單胎早孕期妊娠婦女血清中ADAM12與PAPP-A之間有顯著性相關(guān),與freeβ-hCG之間無相關(guān)性。在中孕期正常妊娠婦女血清中,ADAM12與孕周和孕婦體重之間均存在相關(guān)性(p均<0.05)。ADAM12與AFP之間相關(guān)性有統(tǒng)計學(xué)意義,而與freeβ-hCG之間無顯著性相關(guān)。在胎兒為唐氏綜合征的中孕期妊娠婦女血清中,ADAM12的水平較正常妊娠婦女明顯升高,其ADAM12MoM約為正常中孕婦女ADAM

21、12MoM值的1.2倍,二者之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 5、結(jié)論：
　　 我國人群孕婦血清中ADAM12水平隨孕周的增加而增高,胎兒為唐氏綜合征的中孕期妊娠婦女ADAM12MoM約為正常中孕婦女ADAM12MoM值的1.2倍,二者之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義。ADAM12與PAPP-A及AFP有相關(guān)性,與freeβ-hCG相關(guān)性無統(tǒng)計學(xué)意義。ADAM12是中孕期產(chǎn)前篩查唐氏綜合征的一個有效指標(biāo)。ADAM12與其他血清標(biāo)志物之間

22、存在相關(guān)性,因此對ADAM12在早孕期和中孕期唐氏綜合征產(chǎn)前篩查中的特異性和靈敏度還有待于進一步研究。
　　 6、創(chuàng)新點：
　　 通過對早、中孕期孕婦血清ADAM12變化趨勢的研究,建立了ADAM12在我國人群產(chǎn)前篩查中的參考范圍。通過ADAM12在中孕期產(chǎn)前篩查唐氏綜合征中的研究認為ADAM12是有效的中孕期產(chǎn)前篩查血清學(xué)篩查指標(biāo)。通過ADAM12與其他血清標(biāo)志物相關(guān)性的研究對ADAM12用于產(chǎn)前篩查的特異性進行了探討

23、。
　　 第四部分解整合素金屬蛋白酶12在中孕期正常雙胎妊娠中應(yīng)用的研究。
　　 1、研究背景：
　　 近年來隨著輔助生育技術(shù)的開展及婦女生育年齡后延,雙胎妊娠發(fā)生率呈現(xiàn)升高趨勢。雙胎妊娠中至少一胎為染色體異常的發(fā)生率較同年齡組單胎妊娠高,但對于雙胎妊娠進行產(chǎn)前篩查尚未在臨床中正式開展,這是由于雙胎妊娠的復(fù)雜性使得現(xiàn)有的血清學(xué)產(chǎn)前篩查方案在雙胎妊娠中的應(yīng)用價值一直備受爭議。自從有研究首次報道ADAM12在早孕期妊

24、娠婦女血清中顯著降低以來,人們對于ADAM12應(yīng)用于產(chǎn)前篩查給予了極大的關(guān)注。之前的研究表明,ADAM12可用于早孕期的單、雙胎產(chǎn)前篩查,在中孕期的單胎妊娠的產(chǎn)前篩查中ADAM12的價值也得到肯定,但對于在中孕期雙胎妊娠中應(yīng)用ADAM12進行產(chǎn)前篩查目前尚無報道。我國產(chǎn)前篩查工作起步較晚,篩查模式較為單一,主要是中孕期二聯(lián)或三聯(lián)篩查,對于雙胎妊娠孕婦中孕期血清學(xué)篩查的資料很少,缺乏大樣本系統(tǒng)研究。
　　 2、研究目的：
　

25、　 2.1、探討雙胎妊娠中孕期孕婦血清ADAM12變化規(guī)律,建立中國人群中孕期雙胎妊娠婦女ADAM12水平的正常參考范圍；
　　 2.2、比較雙胎妊娠孕婦與正常單胎妊娠婦女血清ADAM12水平之間的差異,對ADAM12在雙胎妊娠產(chǎn)前篩查中的作用進行探討。
　　 3、方法：
　　 收集孕15+0-19+6周正常雙胎妊娠孕婦306例為研究組,隨機選擇同時期正常單胎妊娠孕婦932例作為對照組；用時間分辨熒光免疫分析技

26、術(shù)測定兩組孕婦血清freeβ-hCG、AFP和ADAM12濃度,觀察中孕期雙胎妊娠和單胎妊娠孕婦上述血清標(biāo)志物的變化特點,比較兩組間ADAM12水平差異。
　　 4、結(jié)果：
　　 所有病例經(jīng)隨訪確定為非唐氏綜合征妊娠。雙胎中有31例是應(yīng)用各種輔助生育技術(shù)后受孕,其余為自然受孕,其ADAM12的水平范圍是465.69-1616.72ng／ml。雙胎孕婦ADAM12MoM的中位數(shù)值約為1.33,而單胎的為1.0,二者之間差異

27、有統(tǒng)計學(xué)意義。在單胎妊娠中ADAM12與AFP顯著相關(guān),與freeβ-hCG無顯著相關(guān),在雙胎妊娠中ADAM12與AFP和freeβ-hCG皆無顯著相關(guān)。
　　 5、結(jié)論：
　　 我們建立了正常中孕雙胎ADAM12的參考范圍465.69-1616.72ng／mL。雙胎的ADAM12MoM較單胎升高,是單胎的1.33倍。ADAM12在雙胎妊娠的產(chǎn)前篩查中是一個有效的血清學(xué)指標(biāo)。
　　 6、創(chuàng)新點：
　　 雙