甘藍(lán)型油菜steroleosin基因的克隆與表達(dá).pdf_第1頁
已閱讀1頁,還剩62頁未讀, 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡(jiǎn)介

1、油體固醇蛋白(steroleosin)是油體膜結(jié)合的一種微量的固醇結(jié)合脫氫還原酶,根據(jù)其分子量分為固醇蛋白A和B。甘藍(lán)型油菜steroleosin-A和steroleosin-B基因cDNAmRNA序列登陸GenBank,序列號(hào)分別為EF198071和DQ648784。mRNA全長(zhǎng)序列分別為1224bp和1608bp,都包含了完整的開放閱讀框和3’末端Poly(A)尾巴結(jié)構(gòu)。兩種mRNA分別編碼349個(gè)和461個(gè)氨基酸殘基的兩種ster

2、oleosin蛋白。 甘藍(lán)型油菜steroleosin-A基因序列長(zhǎng)為1808bp,登錄GenBank,序列號(hào)為EF473268。Steroleosin-A基因在基因序列結(jié)構(gòu)上具有6個(gè)外顯子和5個(gè)內(nèi)含子。內(nèi)含子的剪接符合真核生物內(nèi)含子剪接的GT/AG規(guī)則:即內(nèi)含子的5’端總是GT和3’端總是AG。 甘藍(lán)型油菜steroleosin基因編碼的兩種油體結(jié)合蛋白steroleosin在GenBank上的序列號(hào)為ABM90633

3、和DQ648784。Steroleosin-A蛋白由349個(gè)氨基酸殘基組成,分子量為39kD,等電點(diǎn)6.06;Steroleosin-B蛋白由461個(gè)氨基酸殘基組成,分子量為51kD,等電點(diǎn)6.29,兩者都包含了20種常見氨基酸。蛋白質(zhì)性質(zhì)分析表明兩種甘藍(lán)型油菜steroleosin蛋白均為兩性蛋白質(zhì),帶電荷氨基酸和疏水性氨基酸的含量比較高且基本相同。親水性圖和二級(jí)結(jié)構(gòu)分析表明兩種steroleosin蛋白都可以劃分為兩個(gè)結(jié)構(gòu)域:由N末

4、端約40個(gè)氨基酸殘基組成的α-螺旋(Alphahelix)和C-末端親水性酶結(jié)構(gòu)域。N末端疏水性結(jié)構(gòu)域均包含有一個(gè)潛在的脯氨酸-結(jié)(Proline-Knot)模體,推測(cè)其在steroleosin蛋白和油體錨定結(jié)合上起到重要的作用。軟件分析表明兩種steroleosin的同源性達(dá)到43%。 甘藍(lán)型油菜胚胎中steroleosin-A基因mRNA的轉(zhuǎn)錄表達(dá)是由胚胎發(fā)育來調(diào)控的,具有顯著的“時(shí)、空”特性。用β肌動(dòng)蛋白基因作為內(nèi)參,設(shè)計(jì)

5、基因特異性引物作半定量PCR,擴(kuò)增結(jié)果表明steroleosin-A基因在甘藍(lán)型油菜開花后的花瓣到花后不同發(fā)育時(shí)期的種子中都檢測(cè)到steroleosin-A基因mRNA的表達(dá),到花后發(fā)育20天左右的種子中開始大量的表達(dá)?;ê蟀l(fā)育30天左右的種子中steroleosin-A基因mRNA的表達(dá)量增加到最高值,之后steroleosin-A基因一直保持著很高的mRNA表達(dá)水平。在油菜種子胚胎發(fā)育期間,steroleosin-A基因mRNA的轉(zhuǎn)

6、錄表達(dá)的時(shí)間模式類似于oleosin和caleosin基因,不同的steroleosin-A是在花瓣中也有表達(dá)。在其它含油植物中油體結(jié)合蛋白基因oleosin,caleosin和steroleosin-A轉(zhuǎn)錄的mRNA的富集時(shí)間模式也可能是一致的。Steroleosin-A在萌發(fā)種子的子葉和部分時(shí)期的根和莖中也有表達(dá)。在萌發(fā)的種子中,steroleosin-A基因在吸漲后2-10d的子葉都有表達(dá),在4d時(shí)達(dá)到最大,以后逐漸減弱。在吸漲后

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評(píng)論

0/150

提交評(píng)論