感染性壞死性胰腺炎大鼠模型建立及其機(jī)制的初步探討.pdf_第1頁(yè)
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1、目的:急性胰腺炎繼發(fā)感染是臨床上急性胰腺炎高死亡率的主要原因,然而感染發(fā)生機(jī)制尚未完全闡明。本實(shí)驗(yàn)首先探索采用?;悄懰徕c混合大腸桿菌建立感染性壞死性胰腺炎大鼠模型的可行性;其次通過(guò)檢測(cè)血液中AMY、CRP、TNF-α和IL-1變化,觀(guān)察胰腺病理學(xué)改變,探討感染性壞死性胰腺炎相對(duì)特殊的病理生理發(fā)生機(jī)制,為后續(xù)研究提供初步的實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。 方法:第一部分30只健康雄性SD大鼠隨機(jī)分成三組,每組10只:①C1組:即時(shí)配制大腸桿菌和?;悄?/p>

2、酸鈉的混合液,濃度分別為103個(gè)/ml和5%,按0.1ml/100g將上述混合液經(jīng)膽胰管逆行注射,速度為0.2ml/min;②C2組:大腸桿菌濃度為104個(gè)/ml,余同①組;③C3組:大腸桿菌濃度為105個(gè)/ml,余同①組。觀(guān)察8小時(shí),記錄各組存活率:存活者抽血測(cè)定血清淀粉酶和血液細(xì)菌培養(yǎng),并取胰腺組織行病理學(xué)檢查和細(xì)菌培養(yǎng)。 第二部分32只健康雄性SD大鼠隨機(jī)分成四組,每組8只:①假手術(shù)組(A組),剖腹后僅翻動(dòng)胰腺,不做其他操

3、作;②壞死性胰腺炎組(B組):經(jīng)膽胰管逆行注射5%牛磺膽酸鈉,量按0.1ml/100g,注射速度為0.2ml/分;③感染性壞死性胰腺炎組(C組);經(jīng)胰管逆行注射入大腸桿菌濃度為104個(gè)/ml和?;悄懰徕c濃度為5%的混合液,余同②組;④單純大腸桿菌逆行注射組(D組):經(jīng)膽胰管逆行注射濃度為104個(gè)/ml的單純大腸桿菌液,余同②組。觀(guān)察8小時(shí),存活者抽血測(cè)定血清淀粉酶、C反應(yīng)蛋白(CRP)、TNF-α和IL-1以及血液的細(xì)菌培養(yǎng);同時(shí)觀(guān)察胰

4、腺組織的大體形態(tài),并取胰腺組織進(jìn)行光鏡、電鏡的病理學(xué)檢查和細(xì)菌培養(yǎng)(定性)。 結(jié)果:第一部分①8小時(shí)存活率:C1組和C2組大鼠在8小時(shí)內(nèi)無(wú)死亡,C3組大鼠在8小時(shí)內(nèi)死亡3只。②胰腺組織細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性率:C1組為60%,C2組和C3組均為100%。③血液細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性率:C1組、C2組和C3組分別為20%、30%和57.2%。④隨著不同組別細(xì)菌濃度的逐步升高,8小時(shí)血清淀粉酶測(cè)定結(jié)果也有逐步上升的趨勢(shì),但相互之間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P

5、>0.05)。⑤光鏡下觀(guān)察:三個(gè)實(shí)驗(yàn)組病變嚴(yán)重,均有出血、壞死的改變,濃度較高者病變相對(duì)較重。 第二部分①胰腺組織細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性率:A組、B組、C組和D組分別為0、12.5%、100%、0。②血液細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性率:A組、B組、C組和D組分別為0、12.5%、50%、0。③血清淀粉酶測(cè)定結(jié)果:與A組比較,B組、C組和D組的血清淀粉酶濃度均顯著升高(P<0.01);C組的血清淀粉酶濃度較B組、D組顯著上升(P<0.01)。④血清CRP測(cè)

6、定結(jié)果:與A組比較三個(gè)實(shí)驗(yàn)組CRP濃度均顯著增加(P<0.01);C組CRP濃度顯著高于B、D組組(P<0.01)。⑤血清α-TNF測(cè)定結(jié)果:與A組比較三個(gè)實(shí)驗(yàn)組血清α-TNF均有升高,只有C組的α-TNF濃度的增加有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);A組、D組、B組比較,三組血清α-TNF有上升趨勢(shì),但相互之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,(P>0.05)。⑥血清IL-1的測(cè)定結(jié)果:與A組比較三個(gè)實(shí)驗(yàn)組血清IL-1濃度均顯著增加(P<0.01)。C組

7、血清IL-1濃度較B組、D組顯著升高(P<0.01),B組相對(duì)D組血清IL-1濃度相對(duì)較高,但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。⑦胰腺組織病理學(xué)檢查結(jié)果(光鏡):A組胰腺正常,D組偶見(jiàn)腺細(xì)胞水腫。B組、C組見(jiàn)出血、壞死表現(xiàn):C組病變以壞死為主,B組以出血現(xiàn)象為主。⑧胰腺組織電鏡下典型病理變化。A組與D組腺泡細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)均正常。B組腺泡細(xì)胞內(nèi),分泌顆粒增多,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)輕度擴(kuò)張。C組見(jiàn)分泌顆粒明顯增多,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張明顯。 結(jié)論:①大腸桿

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