1、目的：探討低能量體外震波治療(extracorporealshockwavetherapy，ESWT)對(duì)內(nèi)皮祖細(xì)胞(endothelialprogenitorcells，EPCs)的生物學(xué)功能和對(duì)皮瓣組織內(nèi)多種血管活性因子表達(dá)的影響，并將低能量體外震波(extracorporealshockwave，ESW)干預(yù)與EPCs移植結(jié)合應(yīng)用，探討其改善缺血皮瓣的血流、促進(jìn)其血管新生及增加皮瓣存活的效果，從組織學(xué)、細(xì)胞學(xué)、分子生物學(xué)和基因等多個(gè)

2、層次探討其機(jī)制，從而為促進(jìn)缺血皮瓣的存活、預(yù)防其壞死找到有效的方法，為改善缺血組織的血管新生和提高EPCs移植移植效果尋找新的思路。 方法：用低能量ESW干預(yù)原代的EPCs，比較觀察細(xì)胞的活力、增殖、功能和生長(zhǎng)因子表達(dá)的變化情況；建立大鼠背部超長(zhǎng)寬比例的缺血隨意皮瓣模型，分別用同樣的低能量ESW處理、EPCs移植和EPCs移植后立即加低能量ESW干預(yù)的方法對(duì)皮瓣進(jìn)行治療，在皮瓣手術(shù)后，比較觀測(cè)皮瓣內(nèi)的血流量、皮瓣的存活，皮瓣內(nèi)血

3、管的分布和密度，以及皮瓣內(nèi)血流灌注范圍，檢測(cè)皮瓣組織內(nèi)一氧化氮(No)、內(nèi)皮型一氧化氮合酶(eNOS)、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子-2(FGF-2)的表達(dá)情況，并觀察移植的EPCs在移植入皮瓣后的轉(zhuǎn)歸情況。 結(jié)果：體外實(shí)驗(yàn)顯示，用0.09mJ/mm2、1000脈沖的低能量ESW干預(yù)原代培養(yǎng)的EPCs，不降低細(xì)胞的活力，并可增加其增殖能力，增加其體外成管等生物學(xué)功能，并促進(jìn)細(xì)胞產(chǎn)生NO，表達(dá)VEGF等。體內(nèi)實(shí)

4、驗(yàn)中，分別采用EPCs移植、0.09mJ/mm21000脈沖的低能量ESWT及兩者聯(lián)合應(yīng)用的方法，在皮瓣手術(shù)后立即治療，在術(shù)后10天，皮瓣的成活率分別是61.8％、78.0％、90.1％，而對(duì)照組為49.0％。在低能量ESWT組及兩者聯(lián)合應(yīng)用組，與對(duì)照組和單獨(dú)EPCs移植組相比，術(shù)后皮瓣內(nèi)的血流量改善比較明顯，術(shù)后早期原有的血管發(fā)生了比較明顯的擴(kuò)張，在中后期新血管形成比較明顯，微血管密度增加比較明顯，皮瓣組織內(nèi)NO、eNOS、VEGF和

5、FGF-2的含量及其mRNA的表達(dá)水平提高比較顯著；在聯(lián)合治療組，移植的EPCs在皮瓣內(nèi)存活的數(shù)量多于單獨(dú)EPCs組。單獨(dú)EPCs移植組，上述指標(biāo)較對(duì)照組均有增加，但明顯低于低能量ESWT組及兩者聯(lián)合應(yīng)用組。上述的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)。 結(jié)論：本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果證實(shí)：(1)低能量ESW可以作為一種有效的刺激因素，促進(jìn)EPCs表達(dá)VEGF和NO/eNOS，促其增殖分化，增強(qiáng)其粘附和成管等生物學(xué)功能。(2)低能量ESW作用于

6、皮瓣，可以促使皮瓣組織表達(dá)VEGF、FGF-2、NO/eNOS等血管活性因子，促進(jìn)皮瓣內(nèi)血管發(fā)生擴(kuò)張和新血管形成，從而增加術(shù)后皮瓣的血流量，促進(jìn)其成活。(3)單獨(dú)EPCs移植后，可以在一定程度上改善皮瓣的存活，但其效果有限，低于低能量ESW干預(yù)的方法。(4)EPCs移植后立即用低能量ESW干預(yù)，可以通過(guò)增加皮瓣組織中多種血管活性因子的釋放，增強(qiáng)EPCs的增殖分化及其生物學(xué)功能，從而更加有效地促進(jìn)新血管形成，加快缺血皮瓣的血供重建，擴(kuò)大其