1、研究目的:
　　測定慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)肝纖維化患者的血清干擾素γ(IFN-γ)基因啟動子甲基化和血清中IFN-γ水平,探討IFN-γ基因啟動子甲基化與肝纖維化的關(guān)系,從而揭示慢性乙型肝炎患者血清IFN-γ基因啟動子甲基化及其血清水平在臨床診治中的價(jià)值。
　　研究方法:
　　慢性乙型病毒性肝炎患者(chronic hepatitis B)42例,肝硬化(livercirrhos

2、is)病人14例,均為2011年5月至2012年3月在山東大學(xué)齊魯醫(yī)院肝病科住院病人,慢性乙型病毒性肝炎均為肝穿刺活檢病例,病理結(jié)果均來自于山東大學(xué)齊魯醫(yī)院病理科,病人依照2007年中華肝臟病學(xué)會肝纖維化學(xué)組制定的《肝纖維化診斷及療效評估共識》進(jìn)行分期。慢性乙型肝炎、肝硬化診斷均符合2000年《病毒性肝炎防治方案》所制定的規(guī)定。正常對照10例,來自健康人群志愿者。用甲基化特異性PCR法(Methylation Specific PCR,

3、MSP)測定IFN-γ基因啟動子的甲基化狀態(tài),用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定血清中IFN-γ的水平,以明確甲基化對其分泌水平的影響。用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定血清中肝纖維指標(biāo)Ⅲ型前膠原(PCⅢ)、Ⅳ型膠原(Ⅲ-C)、層粘連蛋白(LN)、透明質(zhì)酸酶(HA)的水平,結(jié)合肝穿刺結(jié)果,明確慢性乙型病毒性肝炎患者肝纖維化的程度(肝纖維化程度分期診斷符合2000年西安會議上修訂的慢性肝炎的病理診斷標(biāo)準(zhǔn))。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS17.0軟

4、件包進(jìn)行,結(jié)果用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,組間差異采用兩組獨(dú)立樣本資料的t檢驗(yàn)或卡方檢驗(yàn),相關(guān)分析采用Pearson線性相關(guān)分析。P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果:
　　1.CHB患者組IFN-γ基因啟動子甲基化程度明顯高于正常人組(P＜0.05);HC患者組IFN-γ基因啟動子甲基化程度明顯高于CHB患者組(P＜0.05)。
　　2.CHB患者組中IFN-γ基因啟動子甲基化程度隨纖維化程度增高而顯著增高

5、(P＜0.05),即S0＜S1＜S2＜(S3+S4)。
　　3.CHB患者S0組病人血清IFN-γ水平低于正常人組,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05),其余各組病人血清IFN-γ水平皆高于正常人組(P＜0.05);HC患者組血清IFN-γ水平明顯高于正常人組(P＜0.05);CHB患者組血清IFN-γ水平明顯低于HC患者組(P＜0.05)。CHB各患者組與HC患者組中,甲基化組IFN-γ水平明顯低于非甲基化組(P＜0.05)。正常人組

6、中IFN-γ水平在甲基化組與非甲基化組中沒有明顯差異(P＞0.05)。
　　4.CHB患者組中血清IFN-γ濃度與纖維化程度分期無明顯相關(guān)性(P＞0.05)。
　　5.CHB患者血清中肝纖維化指標(biāo)(PCⅢ、Ⅳ-C、LN、HA)皆高于正常人組;HC患者血清中肝纖維化指標(biāo)明顯高于CHB患者組(P＜0.05)。
　　6.CHB患者組的血清中肝纖維化程度指標(biāo)與纖維化程度之間的相關(guān)性無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
　　結(jié)論

7、:
　　1.CHB患者中IFN-γ基因啟動子甲基化程度隨纖維化程度增高而顯著升高。提示:IFN-γ基因啟動子異常的甲基化可能參與慢性乙型肝炎肝纖維化的進(jìn)程,因此IFN-γ基因啟動子甲基化可以作為肝臟纖維化早期預(yù)警的生物標(biāo)志物。
　　2.CHB患者血清中IFN-γ的濃度在相同纖維化程度組中,IFN-γ濃度隨著炎癥的加重而增加。提示:慢性乙型肝炎疾病進(jìn)展過程中,炎癥反應(yīng)過程中所產(chǎn)生的某些條件促進(jìn)了IFN-γ的分泌,因而可作為判斷