1、眾所周知,乙型肝炎(HepatitisB)是一種嚴(yán)重威脅人類健康的疾病。截止目前全球約有4億慢性乙型肝炎病毒(HepatitisBvirus,HBV)感染者,且每年約有100萬(wàn)人死于HBV感染引起的諸如肝硬化、肝衰竭和原發(fā)性肝細(xì)胞癌等疾病。然而HBV感染慢性化的機(jī)理至今尚未闡明,這嚴(yán)重阻礙了該疾病的治療。IL-21是一種由活化的CD4+T細(xì)胞和NKT細(xì)胞分泌的多功能細(xì)胞因子。近年研究發(fā)現(xiàn),在慢性病毒感染過(guò)程中,IL-21能夠促進(jìn)CD8+

2、T細(xì)胞的增殖并增強(qiáng)CD8+T細(xì)胞應(yīng)答,在CD4+T細(xì)胞輔助CD8+T細(xì)胞控制病毒感染慢性化中起到重要作用。本研究通過(guò)檢測(cè)不同HBV感染者外周血中特異性T淋巴細(xì)胞IL-21和IFN-γ的表達(dá),從而闡述IL-21在HBV慢性感染者發(fā)病過(guò)程中的作用,為慢性乙型肝炎的治療探尋新的方法。
　　目的:
　　探討不同臨床表現(xiàn)的乙型肝炎病毒感染者外周血中特異性IL-21+CD4+T細(xì)胞及IFN-γ+CD8+T細(xì)胞的差異及其與病毒學(xué)、血清學(xué)和

3、生化學(xué)指標(biāo)的關(guān)系,探討其在乙型肝炎發(fā)病機(jī)制中的作用。
　　方法:
　　1.收集92例不同臨床表現(xiàn)的HBV感染者(其中急性乙型肝炎18例,慢性HBV攜帶者18例,慢性乙型肝炎28例,非活動(dòng)性HBsAg攜帶者28例)及13例健康人外周血,用密度梯度離心法進(jìn)行單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)分離;2.用HBV核心抗原肽庫(kù)對(duì)每例患者PBMC進(jìn)行刺激后,流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測(cè)特異性T淋巴細(xì)胞IL-21及IFN-γ的表達(dá),同時(shí)設(shè)陰性對(duì)照(未刺激

4、)和非特異性刺激(PMA+ionomycin刺激);3.分析特異性IL-21+CD4+T細(xì)胞及IFN-γ+CD8+T細(xì)胞在不同臨床表現(xiàn)的乙型肝炎病毒感染者之間的差異,同時(shí)分析它們之間的相關(guān)性及其與病毒學(xué)、血清學(xué)和生化學(xué)指標(biāo)的關(guān)系。
　　結(jié)果:
　　1.在正常對(duì)照組、急性乙型肝炎組、HBV攜帶組、慢性乙型肝炎組和非活動(dòng)性HBsAg攜帶組中,非特異性及HBV特異性IL-21+CD4+T細(xì)胞比例均高于陰性對(duì)照,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在

5、正常對(duì)照組、急性乙型肝炎組、HBV攜帶組、慢性乙型肝炎組和非活動(dòng)性HBsAg攜帶組中,非特異性IFN-γ+CD8+T細(xì)胞比例均高于陰性對(duì)照和HBV特異性IFN-γ+CD8+T細(xì)胞比例,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　2.非特異性IL-21+CD4+T細(xì)胞比例在急性乙型肝炎組(2.336±0.764％)中較正常對(duì)照組(0.563±0.435%)、HBV攜帶組(0.328±0.181%)、慢性乙型肝炎組(0.469±0.217%)、非活動(dòng)性H

6、BsAg攜帶組(0.584±0.267%)顯著升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P<0.05;在正常對(duì)照組中非特異性IL-21+CD4+T細(xì)胞比例較HBV攜帶組、慢性乙型肝炎組、非活動(dòng)性HBsAg攜帶組也有所升高,但差異未見(jiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。非特異性IFN-γ+CD8+T細(xì)胞比例在急性乙型肝炎組(29.43±18.6%)較正常對(duì)照組(9.08±4.54%)、HBV攜帶組(11.63±9.27%)、非活動(dòng)性HBsAg攜帶組(15.96±17.35%)升高

7、,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P<0.05;急性乙型肝炎組較慢性乙型肝炎組也有所升高,但差異未見(jiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;慢性乙型肝炎組(23.99±19.24%)較正常對(duì)照組和HBV攜帶組升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P<0.05;慢性乙型肝炎組較非活動(dòng)性HBsAg攜帶組也有所升高,但差異未見(jiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　3.HBV特異性IL-21+CD4+T細(xì)胞比例在急性乙型肝炎組(0.836±0.514%)較HBV攜帶組(0.302±0.197%)顯著升高,差異有統(tǒng)

8、計(jì)學(xué)意義,P<0.05;在急性乙型肝炎組較正常對(duì)照組(0.639±0.376%)、慢性乙型肝炎組(0.674±0.741%)、非活動(dòng)性HBsAg組(0.715±0.63%)也有所升高,但差異未見(jiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。HBV特異性IFN-γ+CD8+T細(xì)胞比例在急性乙型肝炎組(3.271±2.686%)較正常對(duì)照組(2.334±2.07%)、HBV攜帶組(2.251±2.076%)、慢性乙型肝炎組(1.987±1.521%)、非活動(dòng)性HBsAg攜帶

9、組(2.608±2.964%)有所升高,非活動(dòng)性HBsAg攜帶組較HBV攜帶組和慢性乙型肝炎組也有所升高,但是差異均未見(jiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　4.除慢性乙型肝炎組(r=0.008,P=0.966)外,病毒特異性IL-21+CD4+T細(xì)胞比例與IFN-γ+CD8+T細(xì)胞比例在正常對(duì)照組(r=0.657,P=0.015)、急性乙型肝炎組(r=0.503,p=0.034)、HBV攜帶組(r=0.793,P<0.001)、非活動(dòng)性HBsAg攜

10、帶組(r=0.638,P=0.0003)組中均有較好的相關(guān)性。
　　5.急性乙型肝炎組及慢性乙型肝炎組中HBV特異性IL-21+CD4+T細(xì)胞比例和HBV特異性IFN-γ+CD8+T細(xì)胞比例與其ALT、AST、HBVDNA、HBsAg、HBeAg定量之間均無(wú)相關(guān)性;HBV攜帶組中HBV特異性IL-21+CD4+T細(xì)胞比例和HBV特異性IFN-γ+CD8+T細(xì)胞比例與其HBVDNA、HBsAg、HBeAg定量之間均無(wú)相關(guān)性。