1、目的：探討功能性T細(xì)胞(Th1、Th2和Th17)在器官移植后不同免疫狀態(tài)下的變化，通過(guò)檢測(cè)不同細(xì)胞代表性的細(xì)胞因子IFN-γ(Th1)、IL-4(Th2)和IL-17A、IL-17F(Th17)在移植后的表達(dá)，為排斥反應(yīng)的預(yù)防、診斷和治療轉(zhuǎn)歸提供輔助依據(jù)。 方法：臨床實(shí)驗(yàn)抽取志愿者血樣包括肝臟移植患者7例、腎臟移植患者15例，正常對(duì)照者9例。分組如下：排斥反應(yīng)組(排斥組)：共10例，其中肝臟移植排斥反應(yīng)4例，腎臟移植排斥反應(yīng)6

2、例，共收集標(biāo)本47例；功能穩(wěn)定組(穩(wěn)定組)：共7例，其中肝臟移植功能穩(wěn)定3例，腎臟移植功能穩(wěn)定4例，共收集標(biāo)本49例；急性腎小管壞死組：急性腎小管壞死5例，共收集標(biāo)本34例；正常對(duì)照組(對(duì)照組)：9例。采用ELISA實(shí)驗(yàn)檢測(cè)血清中IFN-γ、IL-4和IL-17A的表達(dá)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)建立袖套法小鼠頸部心臟移植模型，分組如下：同基因移植組9例(C57BL/6→C57BL/6，同基因組)，異基因移植組12例(BALB/c→C57BL/6，異基因

3、組)和環(huán)孢素干預(yù)組11例(BALB/c→C57BL/6，環(huán)孢素組)。移植心搏動(dòng)減弱時(shí)立即處死小鼠取脾臟，采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)小鼠脾臟CD4+T細(xì)胞中IFN-γ、IL-4、IL-17A和IL-17F的表達(dá)。應(yīng)用SPSS12.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行秩和檢驗(yàn)。 結(jié)果： 臨床實(shí)驗(yàn)結(jié)果：(1)．IL-4檢測(cè)：排斥組IL-4中位數(shù)為1.17pg/ml，明顯低于穩(wěn)定組(3.125pg/ml)和對(duì)照組(5.21pg/ml)，P值均＜0.01；穩(wěn)定

4、組低于對(duì)照組，P＜0.05；ATN組IL-4中位數(shù)為1.12pg/ml，明顯低于穩(wěn)定組和對(duì)照組，P值均＜0.01。(2)．IFN-γ檢測(cè)：排斥組IFN-γ中位數(shù)為33.20pg/ml，明顯高于穩(wěn)定組(2.23pg/ml)和對(duì)照組(4.37pg/ml)，P值均＜0.01。(3)．IL-17A檢測(cè)：排斥組IL-17A中位數(shù)為11.50pg/ml，明顯高于對(duì)照組(2.68pg/ml)、穩(wěn)定組(5.52pg/ml)和ATN組(7.51pg/ml

5、)，P值均＜0.01；ATN組和穩(wěn)定組均高于對(duì)照組，P值均＜0.01。 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果：心臟移植后受者小鼠脾臟CD4+T細(xì)胞中表達(dá)不同細(xì)胞因子的細(xì)胞所占比例：(1)．表達(dá)IL-4的CD4+T細(xì)胞：同基因組和環(huán)孢素組中位數(shù)分別為3.32％和3.58％，明顯高于異基因組(1.01％)，P值均＜0.01。(2)．表達(dá)IFN-γ的CD4+T細(xì)胞：同基因組和環(huán)孢素組中位數(shù)分別為0.79％和0.86％，明顯低于異基因組(2.51％)，P值均＜

6、0.01。(3)．表達(dá)IL-17A的CD+T細(xì)胞：同基因組和環(huán)孢素組中位數(shù)分別為0.94％和1.35％，明顯低于異基因組(2.43％)，P值均＜0.01。(4)．表達(dá)IL-17F的CD4+T細(xì)胞：同基因組中位數(shù)為2.16％，明顯低于異基因組(7.78％)和環(huán)孢素組(8.70％)，P值均＜0.01。 結(jié)論： (1)．器官移植后發(fā)生排斥反應(yīng)時(shí)，IL-4處于表達(dá)水平較低，而IL-17A、IL-17F和IFN-γ則較高；當(dāng)排斥反

7、應(yīng)被糾正后IL-4表達(dá)逐漸升高，而IL-17A和IFN-γ降低，IL-17F則變化不大。 (2)．肝臟、腎臟移植排斥反應(yīng)患者出現(xiàn)臨床表現(xiàn)之前，血清IL-17A和IFN-γ表達(dá)水平已明顯升高；隨著排斥反應(yīng)的糾正它們又顯著下降，由于變化出現(xiàn)早于臨床癥狀，所以可作為預(yù)測(cè)排斥反應(yīng)發(fā)生和糾正的指標(biāo)之一。 (3)．腎移植術(shù)后發(fā)生ATN的患者血清IL-17A處于較高水平，當(dāng)病情好轉(zhuǎn)時(shí)IL-17A也逐步下降，因此IL-17A可以作為預(yù)測(cè)