1、目的 觀察體外培養(yǎng)的小鼠胚胎中腦細胞和肢芽細胞在不同劑量丙戊酸鈉的作用下增殖和分化的變化，探討丙戊酸鈉體外發(fā)育毒性的特點，揭示其致畸性和作用機理。 方法 根據(jù)Flint等報道的微團培養(yǎng)方法，在本實驗室建立小鼠中腦神經(jīng)細胞和肢芽細胞微團培養(yǎng)模型，從12天齡小鼠胚胎中分離出中腦神經(jīng)細胞和后肢芽細胞，體外暴露于不同劑量的丙戊酸鈉(終濃度分別是0、25、50、75、100、150和200mg/l)連續(xù)培養(yǎng)5天。5天后，應

2、用噻嘩藍(MTT)比色方法評估細胞增殖狀況，并估算出細胞集落形成抑制水平，來反映丙戊酸鈉對體外培養(yǎng)的中腦神經(jīng)細胞和肢芽細胞增殖和分化的影響。 結(jié)果 1．不同劑量的丙戊酸鈉對體外培養(yǎng)的胚胎肢芽細胞的增殖和分化均有抑制作用，并有明顯的劑量一效應關(guān)系(r=-0.950，r=-0.968，P<0.05)，其半數(shù)增殖抑制濃度(IP<,50>)和半數(shù)分化抑制濃度(ID<,50>)分別是99.31mg/l，64.82mg/l，IP<,

3、50>/ID<,50>=1.53。 2．不同劑量的內(nèi)戊酸鈉對體外培養(yǎng)的胚胎中腦神經(jīng)細胞的增殖和分化均有抑制作用，并有明顯的劑量-效應關(guān)系(r=-0.961，r=-0.938，P<0.05)，其半數(shù)增殖抑制濃度(IP<,50>)和半數(shù)分化抑制濃度(ID<,50>)分別是124.46mg/l，90.79mg/l，IP<,50>/ID<,50>=1.37。 結(jié)論 根據(jù)Flint，renault等人提出的體外致畸實驗判斷