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![碘對(duì)小鼠CNSⅡ型脫碘酶活性及mRNA表達(dá)的影響.pdf_第1頁(yè)](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/19/13/aa777752-354c-4ea8-9f1f-6d31acd64f01/aa777752-354c-4ea8-9f1f-6d31acd64f011.gif)
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1、目的:本實(shí)驗(yàn)通過(guò)測(cè)定BALB/C小鼠腦D2活性及mRNA表達(dá)量,探討碘對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)D2的影響。 方法:動(dòng)物模型的建立選用斷乳1個(gè)月健康的BALR/C小鼠,將其隨機(jī)分為5組:LI(低碘)組、NI(正常碘)組、HI<,5>(5倍高碘)組、HI<,10>(10倍高碘)組和HI<,50>(50倍高碘)組,LI組飼以低碘料(平均碘含量為20-50μg/kg),飲用去離子水(碘含量為0μg/kg),其它4組飼以正常飼料(平均碘含量為300
2、-400μg/kg),NI組飲用去離子水(碘含量為0μg/L),HI<,5>、HI<,10>、HI<,50>組分別飲用含不同劑量碘化鉀(KI)的去離子水,使各組攝入碘量呈倍數(shù)關(guān)系。在給Ⅺ后的3個(gè)月和6個(gè)月,采用過(guò)硫酸胺消化一砷鈰催化分光光度法測(cè)定各組小鼠尿碘水平,股動(dòng)脈取血,用Bayer化學(xué)發(fā)光方法測(cè)定血清中T<,3>、FT<,3>、T<,4>、FT<,4>,同時(shí)處死動(dòng)物,取大腦、小腦和海馬,采用離子交換層析法測(cè)大腦D2活性,提取組織總
3、RNA,利用熒光定量PCR法,測(cè)定各組動(dòng)物不同腦區(qū)中D2的mRNA表達(dá)。 結(jié)果: (1)尿碘水平:LI組小鼠尿碘很低,NI組及各HI組的尿碘水平隨碘攝入量的增加而增加,增加的幅度與碘攝入量的倍數(shù)基本一致,兩者相關(guān)性好(r=0.96),說(shuō)明不同碘水平的動(dòng)物模型的復(fù)制是成功的。 (2)甲狀腺激素(TH)水平:與NI組相比,3個(gè)月LI組血清中T<,4>、FT<,4>水平明顯降低(P<0.01),各HI組輕微升高,僅HI
4、<,10>組的FT<,4>水平明顯增高(P<0.05),3個(gè)月LI組T<,3>、FT<,3>略增高,各HI組有降低趨勢(shì),其中HI<,5>、HI<,10>和HI<,50>組的T<,3>及HI<,10>、HI<,50>組的FT<,3>水平明顯降低(P<0.01);6個(gè)月LI組T<,3>、FT<,3>、T<,4>、FT<,4>。均明顯降低(P<0.01),其中T<,4>水平甚至測(cè)不出,各HI組均升高,其中HI<,10>組的T<,3>、FT<,
5、3>及HI<,50>組的T<,3>明顯增高(P<0.05),而HI<,5>組的T<,3>、FT<,3>、T<,4>、FT<,4>及HI<,10>組的FT<,40>增高更為顯著(P<0.01),綜上看來(lái),HI<,5>組各激素水平增高最為顯著。 (3)各組小鼠大腦D2活性:3個(gè)月及6個(gè)月U組小鼠大腦D2活性均明顯增高(P<0.05),與NI組相比有顯著差異,隨著碘攝入量的增加,各HI組的D2活性有降低趨勢(shì),但與NI組相比無(wú)顯著性差異
6、。 (4)各組小鼠大腦、小腦及海馬D2 mRNA表達(dá):與M組相比,3個(gè)月及6個(gè)月U組小鼠大腦D2mRNA表達(dá)均顯著增高,6個(gè)月H15組D2mRNA表達(dá)量顯著降低,其余組與NI組相比無(wú)顯著差異;3個(gè)月LI組小鼠小腦D2 mRNA表達(dá)明顯增高,6個(gè)月HI<,5>組小腦D2mRNA表達(dá)明顯降低,其余組與M組相比無(wú)顯著差異;3個(gè)月LI組小鼠海馬D2mRNA表達(dá)明顯增高,6個(gè)月HI<,5>、HI<,10>、HI<,50>組海馬D2mRNA
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