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文檔簡介
1、目的:探討VEGF-C反義寡核苷酸(ASODN)對卵巢癌細(xì)胞株SKOV3生物學(xué)行為的影響。 方法:采用脂質(zhì)體作為載體,將經(jīng)人工合成經(jīng)硫代磷酸修飾的VEGF-C ASODN轉(zhuǎn)染卵巢癌細(xì)胞株SKOV3,MTT法檢測VEGF-CASODN對細(xì)胞的增殖抑制作用;鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化;流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞周期;免疫細(xì)胞化學(xué)SP法檢測細(xì)胞內(nèi)VEGF-C表達(dá)變化;MTT法檢測細(xì)胞粘附能力;Transwell小室體外侵襲遷移實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞侵襲遷移
2、能力;Western-blot檢測細(xì)胞內(nèi)E-cadherin和MMP-2蛋白表達(dá)水平。 結(jié)果:1.VEGF-C ASODN能明顯抑制SKOV3細(xì)胞的增殖能力(P<0.01),并呈劑量-時(shí)間依賴關(guān)系,而LF對照組和SODN組對細(xì)胞生長無明顯抑制作用。2.VEGF-C ASODN能誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,可見核固縮、核碎裂等典型改變。 3.流式細(xì)胞儀檢測顯示VEGF-C ASODN組細(xì)胞凋亡率為14.55%,與對照組和SODN組比較,S期細(xì)胞
3、百分比增高,細(xì)胞阻滯于S期。 4.免疫細(xì)胞化學(xué)S-P法顯示轉(zhuǎn)染VEGF-CASODN后,與對照組和SODN組比較,SKOV3細(xì)胞內(nèi)VEGF-C表達(dá)明顯減弱(P<0.01)。 5.粘附實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示VEGF-C ASODN轉(zhuǎn)染后,在30 min、60 min、90min、120min各時(shí)間段與對照組和SODN組相比細(xì)胞粘附率都有明顯的的下降(P<0.01)。 6.體外侵襲遷移實(shí)驗(yàn)顯示VEGF-C ASODN組穿膜細(xì)胞數(shù)目明顯減少(P<0.0
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