1、腔前卵泡是哺乳動物卵泡發(fā)育的早期階段,但大量的腔前卵泡在發(fā)育到有腔卵泡前發(fā)生閉鎖、退化,沒有得到充分利用,這無疑是動物遺傳與繁育資源的極大損失。哺乳動物腔前卵泡的體外培養(yǎng)的研究有助于揭示卵泡發(fā)育的過程及其機制,可以最大限度利用卵巢資源促進動物繁殖,保護瀕臨滅絕物種以及人類生殖健康。 近年來的研究表明,NO作為一種信號分子,在哺乳動物生殖系統(tǒng)尤其是卵泡的生長發(fā)育調(diào)控方面具有非常重要的作用,如參與卵泡發(fā)育、卵母細胞成熟、排卵及性激素

2、合成等。本試驗以NCSU23為基礎(chǔ)培養(yǎng)液,添加7.5％FBS、2.5mg/mlFSH、3.5μg/ml胰島素、10μg/ml轉(zhuǎn)鐵蛋白和100μg/ml抗壞血酸培養(yǎng)直徑200-300μm豬腔前卵泡,用不同濃度的NO供體硝普鈉(sodium nitroprusside, SNP)(0mmol/L、0.001 mmol/L、0.01mmol/L、0.1 mmol/L和1 mmol/L)處理,觀察卵泡存活、成腔及卵泡直徑變化,并研究培養(yǎng)后的卵泡

3、卵母細胞發(fā)育及卵泡顆粒細胞凋亡情況。 結(jié)果表明：(1)SNP各處理組卵泡在培養(yǎng)過程中直徑變化差異不顯著(P>0.05);(2)卵泡存活率在體外培養(yǎng)后表現(xiàn)差異,在培養(yǎng)第2天和第4天,0.001mmol/L SNP組顯著高于1mmol/L SNP組卵泡存活率(85.28％vs70.6％,P<0.05),與其它各組差異不顯著：(3)各SNP處理組卵泡成腔率,在第2天各組差異不顯著,在第4天以0.001mmol/L SNP組最高(為79

4、.81％),且顯著高于1 mmol/L SNP組(79.81％vs55.22％,P<0.05),與其他各組差異不顯著；(4)培養(yǎng)結(jié)束后的卵母細胞正常率,除1mmol/L,SNP組顯著低于0.001 mmol/L SNP組(P<0.05)外,其余各組間差異不顯著(P>0.05),但以0.001 mmol/L SNP組卵母細胞正常率最高,為50.93％；在COC(cumulus oocyte complexes,COCs)回收率方面,0.0