1、隨著中藥的普遍應(yīng)用和國(guó)際化進(jìn)程的不斷發(fā)展，中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及其質(zhì)量控制的重要性日益彰顯。作為藥品研究、生產(chǎn)和使用的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《中華人民共和國(guó)藥典·2005》亦成為人們的關(guān)注對(duì)象，不斷有文獻(xiàn)質(zhì)疑藥典中某些相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的合理性。作者在參閱文獻(xiàn)、參考藥典的過(guò)程中發(fā)現(xiàn)諸多含有黃連解毒湯典方基本組合黃連-黃芩組合和黃芩-黃柏組合的方劑中所規(guī)定的目標(biāo)檢測(cè)物黃芩苷、小檗堿的標(biāo)示含量限量與中藥有效成分的理論含量之間有巨大差異。如一清顆粒中的目標(biāo)檢測(cè)物黃芩苷的含量

2、限量只相當(dāng)于理論含量的1/9，清胃黃連丸中鹽酸小檗堿的含量限量為理論含量的1/52，這勢(shì)必會(huì)導(dǎo)致國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的質(zhì)量控制失權(quán)，也為制假、銷假提供了可乘之機(jī)。為了探索產(chǎn)生此現(xiàn)象的原因并力求找到解決的辦法，本文以黃連解毒湯為研究平臺(tái)，研究黃連解毒湯配伍組合效應(yīng)對(duì)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制定的影響。本課題研究?jī)?nèi)容包括：黃連解毒湯提取工藝篩選，黃連解毒湯配伍對(duì)化學(xué)成分含量的影響，黃連解毒湯配伍提取物在不同介質(zhì)中的化學(xué)成分含量，黃連解毒湯指紋圖譜的建立四部分。

3、　　 1、黃連解毒湯提取工藝篩選采用水煎醇沉工藝，L9(34)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，反相高效液相色譜(RP-HPLC)法測(cè)定各樣品溶液中梔子苷、黃芩苷和鹽酸小檗堿的含量，考察提取時(shí)間、溶媒量、pH三個(gè)因素對(duì)黃連解毒湯中梔子苷、黃芩苷及鹽酸小檗堿含量的影響并以此判斷較好的提取工藝。結(jié)果表明：溶媒量為16倍，首次提取時(shí)間為30min，第二次提取時(shí)間為15min，溶媒pH為8的條件下提取效果為最好，在此條件下黃芩苷、鹽酸小檗堿、梔子苷的含量分別為2

4、3.36mg/g，2.73mg/g，59.48mg/g。
　　 2、黃連解毒湯配伍對(duì)化學(xué)成分含量的影響采用L8(27)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，以RP-HPLC法測(cè)定黃連解毒湯及其各分解組合方中的梔子苷、黃芩苷、鹽酸小檗堿的含量。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，不同分解方劑中黃芩苷和鹽酸小檗堿含量有很大差異，黃連和黃柏與黃芩配伍后鹽酸小檗堿和黃芩苷的含量都大幅度降低，黃連單煎時(shí)鹽酸小檗堿的含量為9.31mg/g，黃芩單煎時(shí)黃芩苷含量為48.06mg/g,黃連和黃

5、芩合煎后黃芩苷的含量為21.52mg/g，鹽酸小檗堿的含量為0.34mg/g，合煎后較合煎前黃芩苷的含量降低至原來(lái)的44.78％，鹽酸小檗堿含量降低至原來(lái)的3.65％，梔子在該方中能夠緩解這兩種成分降低的幅度，在黃連黃芩組合中加入梔子共煎后黃芩苷的含量為32.88mg/g，鹽酸小檗堿的含量為0.77mg/g，兩者的含量較未加前都有了較大程度的提高，但較單煎液中有效成分含量有很大差距。試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)含有黃連-黃芩組合和黃柏-黃芩組合的方劑提取液

6、在放置過(guò)程中產(chǎn)生大量沉淀，經(jīng)色譜分析，這些沉淀的成分主要是鹽酸小檗堿和黃芩苷。由此可知，以黃連解毒湯中鹽酸小檗堿或黃芩苷含量作為檢測(cè)對(duì)象進(jìn)行質(zhì)量控制的方法不能夠真實(shí)反映方劑的質(zhì)量?！端幍洹?005》中很多方劑如一清顆粒、清胃黃連丸等方劑中都含有類似的配伍組合，使得這些方劑含量測(cè)定項(xiàng)中的黃芩苷和鹽酸小檗堿的規(guī)定量遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于實(shí)際含量。因此，以組方中某一有效成份含量限量為檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)的質(zhì)量控制模式無(wú)法達(dá)到質(zhì)控目的，應(yīng)該建立一種方法來(lái)代替現(xiàn)有的質(zhì)控模

7、式。
　　 3、黃連解毒湯配伍提取物在不同介質(zhì)中化學(xué)成分含量采用隨機(jī)單位組試驗(yàn)設(shè)計(jì)，將黃連解毒湯及其各分解組方的提取物在37℃的人工胃液、人工腸液、蒸餾水中分別感觸處理1.5h，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，人工胃液抑制黃連解毒湯中黃芩苷、鹽酸小檗堿的溶出，感觸后人工胃液中黃芩苷、鹽酸小檗堿的含量分別為18.10mg/g，2.13mg/g，人工腸液促進(jìn)黃連解毒湯中黃芩苷、鹽酸小檗堿的溶出，感觸后人工腸液中黃芩苷、鹽酸小檗堿的含量分別為31.42mg

8、/g，2.72mg/g。由此可知，黃連解毒湯該方適合于制成口服劑型。
　　 4、黃連解毒湯指紋圖譜的建立用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)17批黃連解毒湯提取液的高效液相色譜數(shù)據(jù)進(jìn)行聚類分析，在同一類中選出10個(gè)樣品進(jìn)行色譜法統(tǒng)計(jì)，得到12個(gè)特征指紋峰，以黃芩苷色譜峰作為內(nèi)參照峰，計(jì)算12特征峰的相對(duì)峰面積、相對(duì)保留時(shí)間和相似度，得到黃連解毒湯的數(shù)字化指紋圖譜。試驗(yàn)結(jié)果表明本試驗(yàn)方法能夠?qū)崿F(xiàn)各色譜峰的分離，各單味藥特征峰在復(fù)方圖譜中都體現(xiàn)了出