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![兔雙側頸總動脈中度狹窄對急性全腦缺血再灌注損傷的影響及其機制研究.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/19/12/6d10222f-a856-4735-a29b-9cade65d19f8/6d10222f-a856-4735-a29b-9cade65d19f81.gif)
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文檔簡介
1、目的:觀察兔雙側頸總動脈中度狹窄對急性全腦缺血再灌注損傷的影響及VEGF、Beclin1、RAM-11蛋白的表達變化。
方法:80只雄性新西蘭白兔隨機分為正常組(A,n=5)、偽狹窄組(B,n=5)、狹窄組(C,n=5)狹窄+偽缺血組(D,n=5)、缺血組(E,n=30)、狹窄+缺血組(F,n=30),E、F組在全腦缺血15分鐘后依不同的再灌注時間等分為6個小組,即再灌注1小時、3小時、6小時、12小時、24小時及96小時
2、組。以“針控線栓法”建立雙側頸總動脈中度狹窄,B組偽狹窄術后以及C、D、F組狹窄術后恢復正常喂養(yǎng)15天,E、F組以“夾閉雙側頸總動脈與椎動脈+穩(wěn)定血壓法”建立急性全腦缺血再灌注動物模型。各組于相應時間點取右側額頂葉皮質,觀察腦組織結構及神經(jīng)元內尼氏體含量的變化,免疫組化法半定量Beclin1、VEGF、RAM-11蛋白變化,透射電鏡觀察自噬溶酶體的形成,TUNEL染色檢測神經(jīng)元凋亡數(shù)量的動態(tài)變化。
結果:1.B、C、D組鏡
3、下結構與A組相近,E、F組可見程度不等的缺血損傷;A、B、C、D組尼氏體含量差別無明顯統(tǒng)計學意義(P>0.05);E、F組尼氏體含量不同程度減少,對應時間點F組尼氏體含量較E組多(P<0.05)。2.免疫組化示:(1)A、B、C、D組Beclin1蛋白表達水平低,組間無明顯差別(P>0.05),E、F組1小時起B(yǎng)eclin1蛋白表達增加(P<0.05),于再灌注6小時達高峰,再灌注96小時仍維持在較高水平(P<0.05),對應時間點F組
4、Beclin1蛋白表達較E組高(P<0.05);(2)A、B組VEGF蛋白表達水平低,C、D組VEGF蛋白表達較A、B組高(P<0.05),E、F組VEGF蛋白表達較C、D組高(P<0.05),E、F組VEGF蛋白表達于再灌注24小時達高峰,再灌注96小時VEGF蛋白表達仍維持在較高水平(P<0.05),對應時間點F組VEGF蛋白表達較E組高(P<0.05);(3)A、B、C、D組RAM-11蛋白表達水平低,組間差異無明顯統(tǒng)計學意義(P
5、>0.05),E、F組RAM-11蛋白表達較A、B、C、D組高(P<0.05),E、F組RAM-11蛋白表達于再灌注12小時達高峰,再灌注96小時仍維持在較高水平(P<0.05),對應時間點E組RAM-11蛋白表達較F組高(P<0.05)。3.透射電鏡在A、B、C、D組神經(jīng)細胞內未見到自噬體、溶酶體數(shù)量較少,E、F組于再灌注1小時組見到溶酶體數(shù)量增多和自噬體形成,再灌注3小時最明顯,一直持續(xù)到再灌注96小時。4.A、B、C、D組偶見凋亡
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