1、目的:研究四味土木香散血中移行成分及其血清藥理作用。
　　方法:(1)給藥樣品的制備及其一致性和穩(wěn)定性檢查:①按《中國(guó)藥典》(2010年版)各藥材項(xiàng)下含量測(cè)定方法對(duì)原料藥材進(jìn)行含量測(cè)定;②確定四味土木香散凍干粉的制備工藝并建立其指紋圖譜;③按《中國(guó)藥典》（2010年版）四味土木香散項(xiàng)下含量測(cè)定方法對(duì)四味土木香散凍干粉中異土木香內(nèi)酯、土木香內(nèi)酯進(jìn)行含量測(cè)定。(2)建立四味土木香散血中移行成分的分析方法:①采用液-液萃取法、固相萃取法

2、及有機(jī)溶劑沉淀法對(duì)血清樣品預(yù)處理方法進(jìn)行篩選;②利用紫外分光光度法測(cè)定經(jīng)4倍甲醇、乙腈處理后蛋白質(zhì)的含量;③取給藥30-180min后的大鼠經(jīng)肝門(mén)靜脈、腹主動(dòng)脈采集的含藥血清，采用有機(jī)溶劑沉淀法，利用HPLC法確定最佳采血時(shí)間點(diǎn)。(3)采用UPLC-Q-Exactive/MS法鑒定來(lái)源于藥物的血中移行成分。(4)以不同濃度四味土木香散凍干粉經(jīng)口給藥后的含藥血清為研究對(duì)象，采用FRAP法測(cè)定四味土木香散含藥血清的總抗氧化活性。
　　

3、結(jié)果:(1)在原料藥材合格的基礎(chǔ)上，制備了給藥用四味土木香散凍干粉，其各批次HPLC指紋圖譜相似度均在0.9以上，同時(shí)測(cè)定了四味土木香散凍干粉中異土木香內(nèi)酯、土木香內(nèi)酯的含量，分別不低于0.30 mg/g、0.41 mg/g;(2)對(duì)血清樣品預(yù)處理方法進(jìn)行了篩選，并比較了經(jīng)4倍甲醇與乙腈處理后蛋白質(zhì)的含量測(cè)定，結(jié)果兩種沉淀方法均能將血清中90％以上的蛋白質(zhì)除去，在最佳采血時(shí)間點(diǎn)的選擇中用此兩種方法進(jìn)行血清樣品的前處理，確定給藥90min

4、后經(jīng)肝門(mén)靜脈采血乙腈沉淀處理方法為最佳入血成分分析方法;(3)共鑒定了來(lái)源于四味土木香散中的11個(gè)入血成分，并進(jìn)行了歸屬。(4)比較了不同濃度給藥樣品的抗氧化活性，結(jié)果顯示四味土木香散凍干粉的給藥濃度在0.8-1.6g/ml之間的含藥血清均有抗氧化活性，且給藥濃度與其抗氧化活性呈量效關(guān)系。
　　結(jié)論:本實(shí)驗(yàn)通過(guò)四味土木香散血中移行成分及其血清藥理作用的研究，從大鼠含藥血清中共鑒定了11個(gè)入血成分，該11個(gè)血中移行成分均來(lái)源于四個(gè)單